正常人、良性疾病及腫瘤患者血清中ConA相關N-高甘露糖型、RCAⅠ相關末端Galβ1-4GlcNAc、SNA相關Neu5Aca2-6Gal多糖分子表達的研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文正常人、良性疾病及腫瘤患者血清中ConA相關N高甘露糖型、RCAⅠ相關末端Galβ14GlcNAc、SNA相關Neu5Aca26Gal多糖分子表達的研究姓名：鄒寧申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：張積仁20060515中文摘要括慢阻肺，良性消化系統(tǒng)疾病，膽石癥等。標本收集后一70℃存放。2糖蛋白的分離分別應用ConA(刀豆凝集素)親和層析法、RCAI(蓖麻凝集素I)親和層析法、SNA(接骨木凝集素)親和層析

2、法從詐常人血清中獲得RCAl相關末端GalBl—4GlcNAc糖蛋白、高甘露糖型糖蛋白和末端富含唾液酸糖蛋白，用HRP(辣根過氧化物酶)標記，并保存于一20℃?zhèn)溆谩?多糖分子的檢測檢測方法凝集素一血清HRP標記的糖蛋白法步驟利用過量的外源性凝集素包被96孔酶標板，加入待檢血清，讓凝集素與血清中的多糖分子充分結合后沖洗，凝集素還存在未被占用的結合部位，將這些部位與有HRP標記的特異糖蛋白相結合，通過TMB—H202溶液顯色，測吸收值，血液

3、中多糖分子越多，與HRP標記的特異糖蛋白結合的越少，從而0D值越低，反之越高。實驗控制及結果判斷用親和純化的糖蛋白代替血清作為陽性對照，用PBS溶液代替血清作為陰性對照，用稀釋不同濃度的糖蛋白代替血清做質量控制。以正常人組檢測的平均值減164個標準差后值作為判斷陽性的閾值。結果1正常人血清中測得RCAI相關末端GalBl—4GlcNAc多糖分子的0D值為11870288，良性疾病患者血清中該多糖分子的OD值為0783O204，鼻咽癌、肝

4、癌和結直腸癌患者血清中RCAI相關末端GalBl—4GlcNAc多糖分子的0D值分別為O54110217，0507O189，051l0206。肺癌患者血清中該多糖分子的0D值07000144。2以正常人組檢測的平均值減164個標準差后值作為判斷腫瘤陽性的閾值，正常人該多糖分子的陽性率為38％，良性疾病患者該多糖分子陽性率為188％，『F常人與良性疾病患者血清中該多糖分子的陽性率存在顯著差異，良性疾病的陽性率較高(z2檢驗，PO01)。鼻