圍產(chǎn)期小鼠子宮頸中糖皮質(zhì)激素受體、11β羥基類固醇脫氫酶1和2的免疫定位.pdf

1、宮頸成熟(Cervical ripening)是正常分娩的必要條件，不是繼發(fā)于子宮收縮的被動(dòng)過程，而是一個(gè)多種內(nèi)分泌因素參與的主動(dòng)耗能、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的過程。各種激素和炎癥介質(zhì)通過直接或間接調(diào)節(jié)宮頸內(nèi)組織學(xué)、生物化學(xué)、及形態(tài)學(xué)變化來發(fā)揮它們特有的生理功能使宮頸成熟軟化。其中糖皮質(zhì)激素及其受體的作用一直備受關(guān)注，但其調(diào)控機(jī)制尚不清楚。本研究旨在對(duì)這一機(jī)制進(jìn)行初步闡釋。糖皮質(zhì)激素(Glucocorticoid,GC)是腎上腺皮質(zhì)層束狀帶合成和

2、分泌的一類甾體激素，在機(jī)體的代謝和應(yīng)激等過程中起著重要的作用。糖皮質(zhì)激素通過與其受體結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，其在組織的表達(dá)量在一定程度上決定了組織對(duì)GC的敏感性。11βHSD-1和11βHSD-2是調(diào)節(jié)耱皮質(zhì)激素活性的轉(zhuǎn)化酶，二者作用相反，分別可以活化/失活GC，共同調(diào)節(jié)局部組織細(xì)胞內(nèi)糖皮質(zhì)激素的活性與有效濃度，所以，局部組織對(duì)糖皮質(zhì)激素的的敏感性還取決于糖皮質(zhì)激素代謝酶的表達(dá)量與反應(yīng)方向。
　　糖皮質(zhì)激素是參與分娩的重要激素，通過與

3、其受體結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，但其對(duì)子宮頸成熟擴(kuò)張的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。本研究旨在揭示糖皮質(zhì)激素(GC)及糖皮質(zhì)激素受體(GR)、11β羥基類固醇脫氫酶1和2(11βHSD-1和2)對(duì)圍產(chǎn)期小鼠子宮頸成熟的影響和機(jī)制。實(shí)驗(yàn)選取圍產(chǎn)期5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，分別為產(chǎn)前48 h(-48 h)、產(chǎn)前24 h(-24 h)、分娩時(shí)(0 h)、產(chǎn)后12 h(+12h)和產(chǎn)后48 h(+48 h)，通過ELISA檢測(cè)小鼠血清皮質(zhì)酮濃度變化;用Western Blot

4、法檢測(cè)兔抗人11βHSD-1和-2多克隆抗體及兔抗人糖皮質(zhì)激素受體(NR3C1)多克隆抗體在圍產(chǎn)期小鼠子宮頸組織中的特異性;用免疫組織化學(xué)法分別對(duì)NR3C1、11βHSD-1和11βHSD-2進(jìn)行進(jìn)行免疫定位和半定量檢測(cè)。結(jié)果顯示:ELISA結(jié)果顯示圍產(chǎn)期糖皮質(zhì)激素的濃度呈先升高后下降趨勢(shì)，分娩時(shí)達(dá)到峰值(P＜0.01); Western Blot法檢測(cè)出在35KDa、44KDa和86KDa處分別有11βHSD-1和-2以及NR3C1蛋

5、白特異性條帶的存在。11βHSD-1、11βHSD-2和GR的免疫組化陽(yáng)性染色主要分布于子宮頸的腔上皮、基質(zhì)、血管和平滑肌細(xì)胞，且11βHSD-1/11βHSD-2平均光密度的比值呈現(xiàn)先升高再下降趨勢(shì)，分娩時(shí)比值最高;GR的表達(dá)量也是分娩時(shí)最高，分娩前后較低的趨勢(shì)(P＜0.01)。
　　以上結(jié)果提示分娩時(shí)11βHSD-1合成的糖皮質(zhì)激素及其受體大量增加，參與子宮頸的成熟軟化，分娩后外周血液循環(huán)和子宮頸局部組織糖皮質(zhì)激素水平降低且糖