水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物多殘留檢測(cè)的液相色譜-質(zhì)譜法研究.pdf

1、本試驗(yàn)采用先進(jìn)的同位素稀釋法，拋棄傳統(tǒng)使用的氧化柱，建立不同水產(chǎn)品基質(zhì)中兩種孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝物液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，包括線性離子阱質(zhì)譜法和三重四級(jí)桿質(zhì)譜法。通過(guò)對(duì)線性試驗(yàn)、加標(biāo)回收試驗(yàn)及實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果分析，進(jìn)行方法學(xué)參數(shù)考核。 采用Mcllvaine緩沖液和乙腈提取，堿性氧化鋁和OASIS MCX SPE柱凈化，洗脫液分別采用SRM模式(線性離子阱質(zhì)譜法)及MRM模式(三重四級(jí)桿質(zhì)譜法)檢測(cè)。結(jié)果表明，在線性離子阱

2、質(zhì)譜法中，草魚(yú)、鰻魚(yú)、三文魚(yú)、蝦及貝的平均檢出限(CCa；α 1％)在0.02μg/kg～0.0％μg/kg之間，平均定量限(CCβ；β5％)在0.04μg/kg～0.13μg/kg之間。在5個(gè)不同加標(biāo)水平下草魚(yú)、鰻魚(yú)、三文魚(yú)、蝦及貝樣中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝物平均回收率在84.7％～112.1％之間，日間變異系數(shù)在1.4％～19.8％之間；在三重四級(jí)桿質(zhì)譜法中，草魚(yú)、鰻魚(yú)、三文魚(yú)、蝦及貝的平均檢出限(CCa,a 1％)在0.02μg

3、/kg～0．07μg/kg之間，平均定量限(CCβ；β5％)在0.06μg/kg0.12μg/kg之間。在5個(gè)不同加標(biāo)水平下草魚(yú)、鰻魚(yú)、三文魚(yú)、蝦及貝樣中孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝物平均回收率在84.7％～112.1％之間，日間變異系數(shù)在1.5％～12.8％之間。為考察這四種藥物的穩(wěn)定性，在樣品中按10μg/kg的濃度添加藥物，不同條件取樣提取后HPLC-MS/MS檢測(cè)剩余藥物的含量，計(jì)算其回收率。結(jié)果表明，室溫條件下降解現(xiàn)象尤其明顯，而

4、在-20℃下則只有極少量的降解，并且無(wú)色代謝物更不穩(wěn)定。提取過(guò)程中加入TMPD或抗壞血酸則會(huì)非常有效的減少這種降解過(guò)程。 通過(guò)對(duì)前處理?xiàng)l件及色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行大量的優(yōu)化，使方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度得到了很大提高。這4種化合物均選用3個(gè)子離子進(jìn)行定量和定性分析，完全滿足歐盟2002/675/EC指令規(guī)定對(duì)于禁用藥物的質(zhì)譜確證方法需要4個(gè)確證分(IP)的要求(三個(gè)子離子3×1.5IP)。對(duì)不同實(shí)際魚(yú)樣進(jìn)行檢測(cè)，不僅能對(duì)待測(cè)物準(zhǔn)確定