龜鹿益神配方顆粒對慢性疲勞大鼠行為和骨骼肌線粒體的影響.pdf

1、目的：建立慢性疲勞大鼠模型，觀察龜鹿益神配方顆粒對慢性疲勞大鼠一般情況和行為學指標（力竭游泳時間、鼠尾懸吊靜止時間）的影響，電鏡下觀察慢性疲勞大鼠骨骼肌線粒體微觀結(jié)構(gòu)的變化，檢測血清琥珀酸脫氫酶活性的變化，探討慢性疲勞綜合征的發(fā)病機理；觀察龜鹿益神配方顆粒對慢性疲勞大鼠骨骼肌線粒體微觀結(jié)構(gòu)和血清SDH的影響，探討其作用機制，為龜鹿益神配方顆粒治療CFS的臨床應用提供實驗依據(jù)和理論支持。
　　方法：雄性SPF級SD大鼠40只，體重2

2、00±20克，適應性飼養(yǎng)1周后，隨機抽取16只不進行造模，其余24只進行造模。采用強制力竭游泳，束縛和夾尾復合因素刺激，構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型。造模成功后，未造模者隨機分為兩組，分別為正常組和正常對照組；造模者隨機分為3組，分別為模型組、蓯蓉益腎組、龜鹿益神組。從造模結(jié)束次日起，在正常飼養(yǎng)的基礎上，正常組、模型組給予生理鹽水灌胃；正常對照組、龜鹿益神組給予龜鹿益神配方顆?；鞈乙汗辔?；蓯蓉益腎組給予蓯蓉益腎顆?；鞈乙汗辔?。各組大鼠均給藥1次

3、/d，連續(xù)14天。造模前、造模后及末次給藥后均測一次大鼠體重、力竭游泳時間及鼠尾懸吊靜止時間。上述實驗結(jié)束后，大鼠經(jīng)腹腔麻醉后，取各組大鼠右后肢骨骼肌組織一塊，電鏡下觀察線粒體結(jié)構(gòu)。經(jīng)腹主動脈采血分離上清液，采用ELISA法測定各組大鼠血清SDH活性。采用IBM SPSS19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理。
　　結(jié)果：
　?。?）造模結(jié)束后，各組造模大鼠體重增長緩慢甚至減輕，飲食量、飲水量減少，瞇眼懶動，便溏，毛發(fā)暗淡失去光澤。

4、與正常組比較，正常對照組體重、力竭游泳時間、鼠尾懸吊靜止時間無顯著性差異；模型組、龜鹿益神組、蓯蓉益腎組大鼠體重減輕、力竭游泳時間縮短、鼠尾懸吊靜止時間延長均有顯著性差異。給藥結(jié)束后，與正常組相比，正常對照組力竭游泳時間延長有顯著性差異，龜鹿益神組無顯著性差異，兩組大鼠體重、鼠尾懸吊靜止時間均無顯著性差異；蓯蓉益腎組體重減輕有顯著性差異，力竭游泳時間和鼠尾懸吊靜止時間均縮短無顯著性差異；模型組大鼠體重減輕、力竭游泳時間變短、鼠尾懸吊靜止

5、時間延長均有顯著性差異。與模型組相比，龜鹿益神組、蓯蓉益腎組大鼠體重明顯增加、力竭游泳時間明顯延長、鼠尾懸吊靜止時間縮短均有顯著性差異。與蓯蓉益腎組相比，龜鹿益神組大鼠體重增加、鼠尾懸吊靜止時間縮短均無顯著性差異，力竭游泳時間延長有顯著性差異。
　?。?）模型組大鼠骨骼肌肌原纖維排列紊亂，Z線、M線模糊且排列紊亂，線粒體形狀不規(guī)則，體積較正常組明顯偏小，多數(shù)線粒體出現(xiàn)空泡，膜溶解并相互連接。與模型組相比，龜鹿益神組和蓯蓉益腎組大鼠

6、骨骼肌肌原纖維排列較整齊，Z線、M線清晰且整齊，線粒體體積大，空泡樣變少。與正常組對比，正常對照組大鼠骨骼肌排列更整齊，Z線、M線清晰且排列更有規(guī)則，線粒體結(jié)構(gòu)更完整，且體積大。
　?。?）與正常組相比，正常對照組血清SDH活性明顯降低，有顯著差異；龜鹿益神組大鼠血清SDH活性輕度升高，無顯著性差異；蓯蓉益腎組、模型組大鼠血清SDH活性升高，有顯著性差異。與模型組比較，蓯蓉益腎組、龜鹿益神組血清SDH活性降低，有顯著性差異。與蓯蓉

7、益腎組相比，龜鹿益神組血清SDH活性降低，有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　?。?）本實驗采用非病毒感染的慢性應激刺激方法，即強制力竭游泳，束縛和夾尾激怒的復合因素刺激，構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型。此方法操作性強，能夠模擬導致人類疲勞的內(nèi)外環(huán)境，可復制出人體的慢性疲勞狀態(tài)。
　?。?）龜鹿益神配方顆?？梢匝娱L慢性疲勞大鼠力竭游泳時間，縮短鼠尾懸吊靜止時間，保護線立體結(jié)構(gòu)的完整性，降低血清 SDH的活性。
　?。?）本實驗表

8、明，慢性疲勞大鼠骨骼肌及其線粒體結(jié)構(gòu)易損傷，且不易恢復，血清SDH活性明顯升高。龜鹿益神配方顆?？稍鰪姽趋兰〖捌渚€粒體膜的穩(wěn)定性，促進其損傷的恢復，增強線粒體功能，降低血清SDH活性。提示龜鹿益神配方顆粒可通過保護線粒體結(jié)構(gòu)、增強其功能從而達到抗疲勞的作用，進一步闡釋了慢性疲勞綜合征的發(fā)病機制及龜鹿益神配方顆粒治療該病的作用機理，為臨床應用龜鹿益神配方顆粒治療慢性疲勞綜合征提供了實驗依據(jù)。
　?。?）龜鹿益神配方顆?？勺鳛镃FS的