環(huán)孢素A對(duì)冠心病患者T淋巴細(xì)胞共刺激分子CD40-CD40配體(CD40L)系統(tǒng)、CD134-CD134配體(CD134L)系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過研究冠心病(CHD)患者共刺激分子CD40/CD40配體(CD40L)系統(tǒng)、CD134/CD134配體(CD134L)系統(tǒng)在CHD患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞上的表達(dá)情況，探究相關(guān)免疫機(jī)制在CHD中的作用，并體外應(yīng)用不同濃度環(huán)孢素A(CSA)干預(yù)CD4+T淋巴細(xì)胞共刺激分子CD40/CD40L系統(tǒng)、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達(dá)，為以CD40/CD40L系統(tǒng)、CD134/CD134L系統(tǒng)為靶點(diǎn)的疾病治療提供切實(shí)有效的

2、數(shù)據(jù)，同時(shí)為利用免疫抑制劑治療CHD開展新的思路與方法。
　　方法:選擇2013年3月-2014年1月天津市胸科醫(yī)院心內(nèi)科收治的冠心病或疑診為冠心病患者71例，依據(jù)臨床表現(xiàn)及心電圖、超聲等診斷方法，按照疾病嚴(yán)重程度不同分為4組:急性心肌梗死組(AMI)19例、不穩(wěn)定型心絞痛組(UAP)18例、穩(wěn)定型心絞痛組(SAP)17例和17例正常對(duì)象為對(duì)照組(N);抽取正常對(duì)照組(17人)和冠心病組(54人)外周血，進(jìn)行冠脈造影檢查及相關(guān)血液

3、生化指標(biāo)測(cè)定并收集基礎(chǔ)資料，用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclearcells，PBMCs);利用流式細(xì)胞分析技術(shù)，分析各組PBMCs中CD4+T淋巴細(xì)胞上CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達(dá)百分率，篩選共刺激分子表達(dá)率最高的組別;在加入不同濃度CSA(濃度梯度:0、0.1、0.01、10μg/mL)的情況下，刺激培養(yǎng)共刺激分子表達(dá)率最高組別的PBMCs，培養(yǎng)72

4、小時(shí)后再次利用流式細(xì)胞分析技術(shù)，分析各亞組CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)的表達(dá)百分率。本研究在細(xì)胞水平上評(píng)價(jià)CSA對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞共刺激分子CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)表達(dá)的影響。應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:(1)各組間年齡、 LDL-C、Gensini積分、FT3、HDL-c等化驗(yàn)指標(biāo)比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P＜0.05)，其中

5、年齡、LDL-C、Gensini積分在不同病變程度組間依次升高，F(xiàn)T3、HDL-c在不同疾病嚴(yán)重程度組間依次降低。各組間其余基礎(chǔ)資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。(2) CD4表達(dá)情況:與N組比較SAP組、UAP組、AMI組CD4表達(dá)均出現(xiàn)升高，且隨著病變程度的增加而增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001); CD40表達(dá)顯示:SAP組、UA組、AMI組CD40表達(dá)較N組升高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.001)，SAP組與UA組、AMI

6、組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，UA組與AMI組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05); CD40L表達(dá)顯示:SAP組、 UA組、AMI組中CD40L表達(dá)較N組增高，表達(dá)百分?jǐn)?shù)在不同病變程度組間依次升高，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。CD134、CD134L分子表達(dá)情況:AMI組、UA組CD134表達(dá)較N組增高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其余兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，CD134L表達(dá)在不同病變程度組

7、間進(jìn)行兩兩比較結(jié)果均無顯著性差異(P=0.17)。(3)相關(guān)性分析:Gensini積分與CD40、CD40L表達(dá)量之間呈正相關(guān)(P=0.001)，即隨著Gensini積分的增加CD40、CD40L表達(dá)量也增加，與CD134、CD134L不相關(guān)(P=0.693/0.892)。(4)研究證實(shí)AMI組各種共刺激分子表達(dá)率最高，AMI組中CD40表達(dá)量在CSA干預(yù)濃度0.1μg/mL、1μg/mL組低于0μg/mL、0.01μg/mL組(P＜0

8、.01)，其余兩兩比較結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.076/0.552);CD40L表達(dá)百分?jǐn)?shù)在CSA干預(yù)濃度0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)，并隨CSA干預(yù)濃度的增加呈逐漸降低的趨勢(shì)，而0.1μg/mL組與1μg/mL組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.585);CD134及CD134L表達(dá)百分?jǐn)?shù)在CSA不同干預(yù)濃度四組間顯示隨CSA干預(yù)濃度的增加呈逐漸降低的趨勢(shì)，但組間

9、兩兩比較結(jié)果顯示差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.779/0.721)。
　　結(jié)論:正常人及冠心病患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞均可以表達(dá)共刺激分子CD40/CD40L、CD134/CD134L系統(tǒng)。相比較CD134/CD134L，CD40/CD40L系統(tǒng)通過免疫機(jī)制更多的參與冠心病的發(fā)生與發(fā)展，CD134、CD134L并無明顯作用;CSA通過抑制AMI患者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞共刺激分子CD40/CD40L系統(tǒng)的表達(dá)，可以抑制動(dòng)脈粥樣