HPV病毒顆粒IgG1、IgG2亞類(lèi)抗體與宮頸上皮內(nèi)瘤變關(guān)系的研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開(kāi)： 第一部分：HPV型別與CIN的關(guān)系探討 目的：研究不同程度宮頸病變感染人乳頭瘤病毒(HPV)的亞型種類(lèi)及其與宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)的關(guān)系，并探討多種型別HPV混合感染與宮頸病變發(fā)展的關(guān)系。 方法：選取2006年9月至2007年12月，經(jīng)新柏氏薄層膜式液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)(TCT)異常、高危型HPV-DNA檢測(cè)(第二代雜交捕獲試驗(yàn))陽(yáng)性、電子陰道鏡(EC)檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確

2、診的HPV感染及CIN病例共60例，包括HPV感染、CIN I、CIN Ⅱ-Ⅲ病例各20例，另選正常對(duì)照20例。采用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因分型技術(shù)(簡(jiǎn)稱(chēng)HybriMax)進(jìn)行HPV分型檢測(cè)的研究。 結(jié)果：HPV-DNA陰性率為21.25％，HPV-DNA陽(yáng)性率為78.75％，其中HPV16、58、33、31、18-DNA陽(yáng)性率分別為43.75％、13.75％、7.50％、6.25％、3.75％。多種型別HPV混合感染率為12.

3、50％，其中CIN Ⅱ-Ⅲ組、HPV感染組分別為11.67％、3.33％，與宮頸炎組5％比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。宮頸癌前病變組中，HPV16-DNA陽(yáng)性率為58.33％，與宮頸炎組(0)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其HPV58、33、31、18-DNA陽(yáng)性率(13.33％、10％、8.33％、5％)與宮頸炎組(5％、10％、0、0)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。HPV16-DNA陽(yáng)性與宮頸癌前病變之

4、間呈中度相關(guān)(γ=0.479，P<0.05). 結(jié)論：①HPV16感染與宮頸癌前病變的發(fā)生密切相關(guān)，HPV多種型別混合感染與宮頸病變級(jí)別無(wú)關(guān)。②正常人群有一定HPV攜帶率。 第二部分宮頸局部HPV病毒顆粒IgG1、IgG2亞類(lèi)與CIN的關(guān)系 目的：探討HPV病毒顆粒(VLPs)IgG1、IgG2亞類(lèi)抗體在各級(jí)別宮頸病變患者宮頸組織中的表達(dá)及其與不同級(jí)別宮頸病變的關(guān)系。 方法：選取2006年9月至2007年

5、12月，經(jīng)TCT檢測(cè)結(jié)果異常、高危型HPV-DNA檢測(cè)(第二代雜交捕獲試驗(yàn))陽(yáng)性、EC檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確診的HPV感染及CIN病例共60例，包括HPV感染、CIN Ⅰ、CINⅡ-Ⅲ病例各20例，另選正常對(duì)照20例。采用RT-PCR半定量技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色法，檢測(cè)上述不同宮頸組織中HPVVLPs-IgG1、IgG2表達(dá)。 結(jié)果：①RT-PCR表明，研究組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達(dá)率分別為

6、90％、87％。對(duì)照組分別為85％、90％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。其中HPV感染組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達(dá)率分別為90％、95％，CIN I組均為80％。HPV感染組HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA表達(dá)強(qiáng)度分別為0.611±0.033、0.458±0.076，CINⅠ組分別為1.306±0.022、1.311±0.065。前兩者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。后兩者比較，差異有統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P<0.05)。CIN Ⅱ-Ⅲ組宮頸組織中HPV VLPs-IgG1mRNA及IgG2mRNA表達(dá)率分別為95％、85％，與HPV感染組、CIN Ⅰ組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。但其IgG1 mRNA表達(dá)強(qiáng)度(1.956±0.041)卻明顯高于HPV感染組、CIN Ⅰ組，(P<0.05)。CINⅡ-Ⅲ組HPVVLPs-IgG2mRNA表達(dá)強(qiáng)度(1.512±0.037)與CINⅠ組、對(duì)照組(1.540±0.055)相當(dāng)

8、，但HPV感染組IgG2mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯低于其它三組(P<0.05)。對(duì)照組HPVVLPs-IgG1mRNA表達(dá)率為85％，表達(dá)強(qiáng)度為0.403±0.005，與HPV感染組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。對(duì)照組HPV VLPs-IgG2mRNA的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于其IgG1mRNA表達(dá)強(qiáng)度，(P＜0.05)。對(duì)照組、HPV感染組、CIN Ⅰ組以IgG2為主導(dǎo)狀態(tài)的百分率較CINⅡ-Ⅲ組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)

9、。HPV感染組、CINⅠ組分別與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05). ②免疫組化結(jié)果表明，研究組宮頸組織HPV VLPs-IgG1、IgG2抗體表達(dá)率分別為62％、65％，與對(duì)照組(5％、100％)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著CIN級(jí)別增高，HPV VLPs-IgG1表達(dá)有逐漸增強(qiáng)趨勢(shì)。HPV VLPs-IgG1表達(dá)在CINⅡ-Ⅲ組均為陽(yáng)性，在正常對(duì)照組、HPV感染組、CIN Ⅰ組分別為5％、20％、6

10、5％。HPV感染組、CIN Ⅰ組、CIY Ⅱ-Ⅲ組組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HPV感染組與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在對(duì)照組中，HPVVLPs-IgG2表達(dá)均為陽(yáng)性，明顯高于其IgG1表達(dá)率。HPV感染組、CINⅠ和CINⅡ-Ⅲ組HPV VLPs-IgG2表達(dá)率分別為30％、75％、90％。HPV感染組IgG2表達(dá)率顯著低于對(duì)照組、CIN Ⅰ組、CIN Ⅱ-Ⅲ組，(P＜0.05)。CINⅠ組、CIN

11、Ⅱ-Ⅲ組與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。對(duì)照組中，HPV VLPs-IgG1主要為陰性表達(dá)，IgG2陽(yáng)性細(xì)胞彌漫分布于宮頸基質(zhì)層。HPV感染組中，HPV VLPs-IgG1、IgG2陽(yáng)性細(xì)胞多散在分布于宮頸基質(zhì)層，宮頸上皮層幾乎無(wú)表達(dá)。CIN Ⅰ組中，HPVVLPs-IgG1、IgG2陽(yáng)性細(xì)胞彌漫分布于宮頸基質(zhì)，宮頸上皮層僅少量表達(dá)。ClNⅡ-Ⅲ組中，HPV VLPs-IgG1、IgG2陽(yáng)性細(xì)胞均彌漫分布于宮頸基質(zhì)以及宮

12、頸鱗狀上皮下2／3以上或全層。 結(jié)論：②HPV VLPs-IgG1、IgG2mRNA，IgG1、IgG2陽(yáng)性表達(dá)率在宮頸高級(jí)別病變中增高，可能與HPV持續(xù)感染和CIN進(jìn)展有關(guān)。②機(jī)體感染HPV后，低級(jí)別宮頸病變組、對(duì)照組以IgG2主導(dǎo)的宮頸局部免疫狀態(tài)，可能與HPV清除和宮頸病變逆轉(zhuǎn)有關(guān)。②HPV VLPs-IgG1陽(yáng)性表達(dá)位置分布與宮頸病變級(jí)別相關(guān)。 第三部分血清HPV16病毒顆粒IgG1、IgG2亞類(lèi)與CIN的關(guān)系

13、 目的：探討HPV16VLPs-IgG1、IgG2亞類(lèi)抗體在各級(jí)別宮頸病變患者血清中的表達(dá)及其與不同級(jí)別宮頸病變的關(guān)系。 方法：選擇2006年9月至2007年12月間，TCT檢測(cè)結(jié)果異常、高危型HPV-DNA檢測(cè)(第二代雜交捕獲試驗(yàn))陽(yáng)性、EC檢查以及宮頸活檢或?qū)m頸切除術(shù)后病理確診的HPV感染及CIN病例共105例，包括HPV感染32例、CIN Ⅰ 30例、CINⅡ-Ⅲ43例，另選正常對(duì)照24例。ELISA法檢測(cè)患者血清H

14、PV16VLPs-IgG1、IgG2亞類(lèi)抗體的表達(dá)水平。 結(jié)論：①血清HPV16VLPs-IgG及其亞類(lèi)抗體檢測(cè)與HPV-DNA檢測(cè)結(jié)論基本一致。血清學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性既可代表現(xiàn)存HPV感染，也可表示既往HPV感染。②宮頸癌前病變尤其是CINⅠ-Ⅲ患者血清HPV16VLPs-IgG及其亞類(lèi)表達(dá)增高，可能與病毒持續(xù)時(shí)間、病變嚴(yán)重程度有關(guān)。③機(jī)體感染HPV后，低級(jí)別宮頸病變組、對(duì)照組血清HPV16VLPs-IgG2抗體表達(dá)增高(IgG2／I