VEGF-165-GMs復(fù)合自體顆粒骨修復(fù)兔陳舊性橈骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]
　　 骨缺損一直是骨科臨床治療的棘手問(wèn)題。自體骨移植仍是目前臨床最常用，而且是公認(rèn)的具有良好骨修復(fù)效果的方法，是骨缺損治療的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但在實(shí)際的骨缺損修復(fù)過(guò)程中，許多組織內(nèi)外因素將從細(xì)胞、分子以及基因水平影響或干擾修復(fù)過(guò)程，從而難以達(dá)到理想的臨床治療目標(biāo)。血管化是骨移植后骨修復(fù)的重要環(huán)節(jié)。組織器官移植在植入人體后能否發(fā)揮最大作用，很大程度取決于其與宿主的血運(yùn)建立。陳舊性骨缺損周?chē)浗M織以炎癥瘢痕纖維組織增生為主，其受

2、床血供較差，所以臨床上一些骨缺損患者雖用骨質(zhì)量較好的自體骨進(jìn)行移植治療仍可能再次出現(xiàn)骨延遲愈合或骨不連。其主要原因之一就是術(shù)后血供未能有效建立。如何能使移植骨骼發(fā)揮最大生物學(xué)效應(yīng)，是一個(gè)值得研究的課題。本實(shí)驗(yàn)研究旨在探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-165明膠緩釋微球(Vasular endothelial growthfactor-165-gelatinmierospheres，VEGF-165-GMs)復(fù)合自體顆粒骨修復(fù)陳舊性兔橈骨缺損是否可改

3、善局部的血運(yùn)，從而促進(jìn)陳舊性骨缺損的修復(fù)，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 [方法]
　　 (1)采用改良的雙相乳化冷凝交聯(lián)法制備VEGF-165-GMs，并檢測(cè)其形態(tài)，粒徑，載藥率及體外緩釋規(guī)律；
　　 (2)制作與臨床陳舊性骨缺損病理改變相似的兔橈骨陳舊性缺損動(dòng)物模型，并通過(guò)病理學(xué)及影像學(xué)驗(yàn)證；
　　 (3)使用VEGF-165-GMs復(fù)合自體顆粒骨修復(fù)兔橈骨缺損進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，不同時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物行大體、

4、影像學(xué)、生物力學(xué)、骨密度、組織學(xué)、血管密度檢查。用SPSS13.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)改良雙相乳化冷凝交聯(lián)法制備rhVEGF-165-GMs檢測(cè)結(jié)果形態(tài)及粒徑：掃描電鏡觀察固化后的微球表面均勻、圓整，表面有三維網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)，復(fù)合VEGF-165后表面三維網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)封閉。經(jīng)圖像分析儀檢測(cè)，直徑為35～101nm，平均直徑為68.6nm，其中80％微球粒徑位于55nm～78nm。載藥率

5、：微球載藥率為0.2％，即每毫克微球中含2ug。體外釋藥實(shí)驗(yàn)：釋藥結(jié)果表明VEGF-165-GMs微球的體外釋藥符合雙相動(dòng)力學(xué)釋藥規(guī)律，即初相為快速釋藥相，后相為緩釋相。體外釋藥曲線可見(jiàn)90％的VEGF-165在10天左右釋放完成。
　　 (2)動(dòng)物模型制作結(jié)果8周見(jiàn)骨缺損區(qū)無(wú)骨性連接，斷端硬化，髓腔封閉，斷段為纖維瘢痕組織填塞。病理和影像學(xué)改變與臨床陳舊性骨缺損病理改變相似，合乎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的要求。
　　 (3)VEG

6、F-165-GMs復(fù)合自體顆粒骨修復(fù)兔橈骨缺損結(jié)果VEGF-165-GMs復(fù)合自體顆粒骨組和單純自體顆粒骨組均能較好地修復(fù)陳舊性骨缺損，VEGF-165-GMs復(fù)合自體顆粒骨組具有更好更快的骨修復(fù)功能，具體表現(xiàn)為術(shù)后血運(yùn)重建、早期血管形成、移植骨存活、軟骨內(nèi)成骨量、骨骼改建塑性質(zhì)量及速度等方面優(yōu)于對(duì)照組。
　　 [結(jié)論]
　　 (1)探索出VEGF-165-GMs的有效制備方法，所得方法制備工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好，制備的VE