龍血生肌膏對(duì)大鼠失神經(jīng)支配創(chuàng)面神經(jīng)肽P物質(zhì)分泌和神經(jīng)纖維再生影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　觀察龍血生肌膏對(duì)大鼠失神經(jīng)支配創(chuàng)面愈合的作用，并通過測定神經(jīng)肽 P物質(zhì)和神經(jīng)纖維的含量，探討龍血生肌膏促進(jìn)失神經(jīng)支配創(chuàng)面愈合的作用機(jī)理。
　　方法：
　　清潔級(jí)健康SD雄性成年大鼠168只，體重220～250g。完全隨機(jī)法分成4組即龍血生肌膏組（A組）、生肌愈皮膏組（B組）、失神經(jīng)創(chuàng)面組（C組）、正常創(chuàng)面組（D組）。將A、B、C三組大鼠的T11、T12、T13、L1、L2脊神經(jīng)根離斷，在全部大鼠背側(cè)做一直徑

2、為1.5cm的圓形深度達(dá)肌膜下2mm的組織缺損深創(chuàng)面。A組創(chuàng)面以龍血生肌膏外用，每個(gè)創(chuàng)面0.1g；B組創(chuàng)面以生肌愈皮膏外用，每個(gè)創(chuàng)面0.1g；C組、D組創(chuàng)面均以凡士林外用，創(chuàng)面以紗布包扎，每日定時(shí)換藥1次，于造模后1天、4天、7天、11天、15天、21天、28天七個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀察記錄創(chuàng)面的愈合情況、計(jì)算創(chuàng)面面積和完全愈合時(shí)間并取材，制備組織切片進(jìn)行HE常規(guī)組織學(xué)染色、GENMED神經(jīng)纖維銀染色和P物質(zhì)的免疫組織化學(xué)染色。光鏡下觀察 HE染色

3、各組創(chuàng)面組織形態(tài)學(xué)變化，成纖維細(xì)胞、膠原纖維形態(tài)及數(shù)量變化；光鏡下觀察 GENMED還原銀染色各組神經(jīng)纖維再生變化；光鏡下觀察免疫組化染色P物質(zhì)的表達(dá)變化；對(duì)創(chuàng)面中成纖維細(xì)胞、再生神經(jīng)纖維進(jìn)行人工計(jì)數(shù)；用圖像分析儀及分析軟件分析各組創(chuàng)面膠原纖維面積，SP陽性表達(dá)面積。所得結(jié)果用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　結(jié)果：
　?、賱?chuàng)傷后的早期，龍血生肌膏組創(chuàng)面濕潤，滲出較多，藥物呈液體狀均勻覆蓋于創(chuàng)面上。其他組創(chuàng)面干燥

4、，滲出少；愈合過程中，肉芽組織增生和再上皮化程度，龍血組和生肌組無明顯差別，均優(yōu)于失神經(jīng)創(chuàng)面組，同時(shí)正常創(chuàng)面組愈合情況要優(yōu)于失神經(jīng)創(chuàng)面組。
　?、趧?chuàng)面愈合時(shí)間比較：龍血生肌膏組和生肌愈皮膏組的創(chuàng)面愈合時(shí)間無明顯差別，均比非藥物組（C組和D組）縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)，失神經(jīng)創(chuàng)面組愈合時(shí)間比正常創(chuàng)面組明顯延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。
　?、蹌?chuàng)面愈合率比較：除去第一天創(chuàng)面未見明顯愈合外，其他時(shí)間點(diǎn)龍血生

5、肌膏組和生肌愈皮膏組的創(chuàng)面愈合率無明顯差異，均高于非藥物組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)，失神經(jīng)創(chuàng)面組愈合率低于正常創(chuàng)面組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)。
　?、蹾E形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果比較：HE染色結(jié)果顯示，創(chuàng)面愈合過程中，龍血生肌膏組創(chuàng)面的炎細(xì)胞浸潤、肉芽組織增生和成纖維細(xì)胞的數(shù)量均優(yōu)于非藥物組，與生肌愈皮膏組無明顯差異。
　?、輨?chuàng)面神經(jīng)纖維的再生比較：龍血生肌膏組和生肌愈皮膏組在第4、7、11天神經(jīng)纖維大量再生，第1

6、5天達(dá)到高峰，與失神經(jīng)創(chuàng)面組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　⑥創(chuàng)面P物質(zhì)(SP)的表達(dá)比較:從SP表達(dá)的動(dòng)態(tài)趨勢來看龍血生肌膏和生肌愈皮膏組基本一致，較其他兩組提前達(dá)到高峰。從SP表達(dá)量上觀察，龍血生肌膏組明顯高于其他3組。
　　結(jié)論：
　　第一，龍血生肌膏能促進(jìn)失神經(jīng)支配創(chuàng)面的愈合速度；第二，龍血生肌膏能促進(jìn)失神經(jīng)支配創(chuàng)面愈合過程中神經(jīng)肽P物質(zhì)的分泌和神經(jīng)纖維的再生，龍血生肌膏的促愈合作用機(jī)理可能與促進(jìn)神經(jīng)肽P物質(zhì)分泌