富硒G3菌與牛初乳復(fù)配對(duì)小鼠免疫功能的影響和G3菌保藏方法初探.pdf

1、本文對(duì)本實(shí)驗(yàn)室篩選出的沼澤紅假單胞菌G3菌株進(jìn)行耐硒馴化，提高G3菌對(duì)亞硒酸鈉的耐受性，制備富硒G3菌，將富硒G3菌與牛初乳復(fù)配形成富硒牛初乳，初步探討了富硒牛初乳對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影響，并初步研究G3菌保藏方法，為G3菌的保藏提供一種新的思路。
　　 為了提高G3菌對(duì)亞硒酸鈉的耐受性，首先對(duì)G3菌進(jìn)行耐硒馴化，形成耐硒G3菌。以分批補(bǔ)硒補(bǔ)料方式對(duì)耐硒G3菌進(jìn)行培養(yǎng)，得到富硒G3菌。以紫外分光光度法對(duì)富硒G3菌

2、進(jìn)行硒含量的測(cè)定，結(jié)果表明，富硒G3菌的總硒含量為875.033±17.176μg/g，其中，有機(jī)硒含量為847.423μg/g，有機(jī)硒轉(zhuǎn)化率為96.845％。
　　 通過將富硒G3菌與牛初乳按質(zhì)量比硒：牛初乳=1:20000的比例復(fù)配形成富硒牛初乳。小鼠急性毒性試驗(yàn)表明，富硒G3菌、牛初乳、富硒牛初乳均屬實(shí)際無毒。用環(huán)磷酰胺構(gòu)建小鼠免疫低下模型，對(duì)免疫低下小鼠灌胃富硒G3菌、牛初乳和富硒牛初乳，30 d 后測(cè)定各組小鼠臟器指數(shù)

3、、白細(xì)胞數(shù)、T 淋巴細(xì)胞陽性率、血清SOD 酶活性、全血GSH-Px 酶活性，同時(shí)計(jì)算料重比。試驗(yàn)表明，富硒G3菌、牛初乳、富硒牛初乳均能提高免疫低下小鼠對(duì)飼料的利用率，提高SOD、GSH-Px 酶活性，增強(qiáng)小鼠的免疫功能，其中富硒牛初乳高劑量組效果最為顯著，達(dá)到了空白對(duì)照組的水平。
　　 對(duì)小鼠肝臟、腎臟及糞便進(jìn)行硒含量的測(cè)定，結(jié)果表明，灌胃不同劑量的硒均能提高小鼠組織內(nèi)的硒含量，而糞便中硒含量雖有所提高，但與免疫低下模型組相

4、比，并無顯著差異。
　　 為了給G3菌的保藏提供一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，同時(shí)也為G3菌的運(yùn)輸尋找一種便捷的方式，本試驗(yàn)在液體G3菌中加入十二水合硫酸鋁鉀對(duì)G3菌進(jìn)行絮凝。通過測(cè)定絮凝率，確定十二水合硫酸鋁鉀的最佳加入量為每L菌液中加入10％十二水合硫酸鋁鉀60 ml。在絮凝后的G3菌中加入海藻糖作為保護(hù)劑，以超細(xì)陶瓷粉為載體對(duì)G3菌進(jìn)行吸附固定，形成粉末狀的G3菌，分別放于常溫、4 ℃、-20 ℃保藏，每2個(gè)月對(duì)固定化保藏的G3菌進(jìn)