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文檔簡介
1、魚類遠緣雜交是指親緣關系在種或種以上的兩種魚類之間的雜交,其能有效的整合雙親的優(yōu)點,可能使雜交后代在外形、生長速度、存活率以及抗病能力等方面表現出雜種優(yōu)勢,因此遠緣雜交是一種重要的魚類遺傳育種和性狀改良方法。另外,遠緣雜交也已被證明是形成多倍體的一種重要方式。本研究在通過將雌性黃尾密鲴(2n=48)和雄性翹嘴紅鲌(2n=48)進行亞科間遠緣雜交,成功獲得鲴鲌雜交F1代的基礎上,對雜交后代的DNA含量、染色體數目、外形特征、5SrDNA的
2、結構組成與變異及染色體定位、Sox基因等生物學特征進行了系統研究,主要研究內容如下:
1)通過雌性黃尾密鲴與雄性翹嘴紅鲌遠緣雜交獲得了鲴鲌雜交F1代。利用流式細胞儀測定法和外周血細胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測方法對鲴鲌F1的倍性進行檢測,結果表明鲴鲌F1為二倍體(2n=48)。對兩年齡的二倍體鲴鲌的可數性狀進行了系統分析,結果表明其部分性狀偏向于父本或者母本,也有居于父母本之間的,體現出雜交特性,還有較父母本高的。性腺石蠟切片表明雌
3、性二倍體鲴鲌具有正常發(fā)育的卵巢。
2)對二倍體鲴鲌及其親本的5SrDNA進行了克隆及測序分析和染色體定位。發(fā)現在黃尾密鲴中含有兩種大小分別為188bp和221bp的5SrDNA結構單元,分別命名為結構單元Ⅰ和結構單元Ⅱ;翹嘴紅鲌中除單元Ⅰ外,還有結構單元Ⅲ(286bp);二倍體鲴鲌除遺傳獲得結構單元Ⅰ和結構單元Ⅲ外,還衍生出結構單元Ⅳ(212bp),但并未觀察到結構單元Ⅱ。5SrDNA-188bp探針熒光原位雜交實驗發(fā)現,在鲴
4、鲌及其親本染色體中期分裂相中明顯可見四個信號,兩個位于一對最大的亞中部著絲粒染色體上,另一對位于一對亞端部著絲粒染色體上。這些結果表明鲴鲌雜交后代在遺傳了親本大部分5SrDNA結構單元的同時,也發(fā)生了5SrDNA結構單元變異。
3)參照Sox基因保守的HMG框序列,設計合成一對簡并引物對雜交后代及其親本的全基因組DNA進行了PCR擴增和測序分析,并將二倍體鲴鲌與其親本Sox基因進行了比較分析。發(fā)現黃尾密鲴中有三個Sox片段,S
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