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1、I摘要土壤細(xì)菌是陸地生態(tài)系統(tǒng)生物化學(xué)循環(huán)過程中重要的驅(qū)動(dòng)者,參與了土壤大多數(shù)養(yǎng)分元素的轉(zhuǎn)化。農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)是土壤生態(tài)系統(tǒng)當(dāng)中最活潑且固碳潛力最大的碳庫(kù)之一,自養(yǎng)細(xì)菌在農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)固碳過程中起著重要作用。因此,本文采用高通量測(cè)序(highthroughputsequencing)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(realtimePCR)、克隆測(cè)序及末端限制性酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(terminalrestrictionfragmentlengthpol
2、ymphismTRFLP)等分子生物學(xué)技術(shù),研究了不施化肥秸稈不還田(CK),施化肥秸稈不還田(CKF),不施化肥秸稈還田(WNF)及施化肥秸稈還田(WF)4種不同施肥措施對(duì)砂姜黑土細(xì)菌及固碳細(xì)菌群落組成、結(jié)構(gòu)及豐度的影響。研究結(jié)果可以為改善砂姜黑土的土壤生物肥力及旱地農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)生物固碳提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)與CK相比,WF處理土壤養(yǎng)分含量提高最為明顯,有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮、速效磷和速效鉀含量分別提高了23.9%、31
3、.3%、35.1%、339.8%和37.4%。與CK相比,CKF處理土壤養(yǎng)分均有一定程度提高,但增幅較WF小。CK相比,WNF養(yǎng)分含量沒有明顯增加。以上結(jié)果表明施肥顯著提高了土壤的全氮、有機(jī)質(zhì)和速效養(yǎng)分含量,僅僅采用秸稈還田對(duì)土壤養(yǎng)分影響不大。同時(shí),施肥及秸稈還顯著降低了土壤pH值,其中秸稈還田配施化肥土壤pH值最低,為5.27。(2)四種施肥制度砂姜黑土細(xì)菌豐度為1.39109~2.04109拷貝g干土,施肥及秸稈還田均能顯著增加土壤
4、細(xì)菌的豐度,其中,WNF處理土壤細(xì)菌豐度顯著大于其他處理。高通量測(cè)序共獲得了228603條讀數(shù)(Reads),四個(gè)處理在97%相似水平上產(chǎn)生的可操作分類單元(operationaltaxonomicunitsOTUs)數(shù)目分別為4964(CK)、4291(CKF)、5618(WNF)和4600(WF)。砂姜黑土細(xì)菌類群豐富,主要分布在19個(gè)已知細(xì)菌門,41個(gè)已知的細(xì)菌綱以及286個(gè)已知細(xì)菌屬。砂姜黑土細(xì)菌優(yōu)勢(shì)門(相對(duì)豐度5%)主要包括P
5、roteobacteria、Acidobacteria、Actinobacteria、Bacteroidetes、Gemmatimonadetes和Chloflexi;優(yōu)勢(shì)綱(相對(duì)豐度5%)主要包括Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Gammaproteobacteria、Deltaproteobacteria、Acidobacteria、Sphingobacteriia、Actinobacte
6、ria、Gemmatimonadetes和Thermoleophilia。已知優(yōu)勢(shì)屬(相對(duì)豐度1%)共有42個(gè),主要包括Sphingomonas、Gemmatimonas、Flavisolibacter、Ramlibacter、Haliangium、Mucilaginibacter、Massilia、Rhizomicrobium、Flavobacterium、Bryobacter、Granulicella等。三個(gè)處理中均有分布的已知優(yōu)勢(shì)
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