在卡鉑所致的大鼠急性腎損傷中腎損傷分子-1的表達及鹽酸乙酰左卡尼汀對其保護作用的研究.pdf

1、目的：鹽酸乙酰左卡尼汀作為機體自身可以分泌的物質它有強大的抗氧化損傷能力，而卡鉑腎損傷的一個重要的機制便是通過氧化損傷導致腎小管細胞受損，但目前國內對這方面研究較少，本實驗將通過建立卡鉑導致腎損傷的動物模型，通過建立正常、腎損傷及藥物治療對照組模型進行實驗研究，從而判斷鹽酸乙酰左卡尼汀對卡鉑腎毒性的臨床應用價值及腎損傷分子-1在診斷急性腎損傷過程中的意義。
　　方法：本實驗將選用65只健康雄性 SD（Sprague-Dawle）大

2、鼠并進行隨機分組，分為三個組：第一組正常對照組（CN）5只、第二組卡鉑模型組（CP）30只、第三組鹽酸乙酰左卡尼汀干預組（LC+CP）30只。正常對照組：每日給予腹腔注射生理鹽水5ml/kg，連續(xù)4d，第5d時處死；卡鉑模型組：每日給予腹腔注射生理鹽水5ml/kg，連續(xù)4d，第5d將卡鉑干粉用生理鹽水溶解為1mg/ml的液體，按照7mg/kg進行腹腔注射，注射卡鉑溶液的雄性 SD大鼠分別在第6h、12h、24h、48h、3d、5d時，隨

3、機抽取5只大鼠處死；鹽酸乙酰左卡尼汀干預組：將鹽酸乙酰左卡尼汀干粉用生理鹽水溶解為100mg/ml的液體，按照500mg/kg進行腹腔注射，連用4d，第5d分別將卡鉑干粉用生理鹽水溶解為1mg/ml的液體，按照7mg/kg進行腹腔注射，用藥后的雄性SD大鼠分別在第6h、12h、24h、48h、3d、5d后，隨機抽取5只大鼠處死。所有大鼠處死時均做膀胱穿刺取尿留取尿液標本，測定尿液腎損傷分子-1，同時留取靜脈血標本測定血清肌酐、血清腎損傷

4、分子-1；同時取腎組織勻漿測定腎組織腎損傷分子-1及提取RNA做實時熒光定量PCR來測定 Kim-1表達；取腎組織應用10％福爾馬林固定，并行石蠟包埋做 HE染色，以觀察腎臟病理學改變。
　　結果：與正常對照組相比卡鉑模型組的大鼠肌酐在1d時開始明顯升高（P<0.05），3d時增高速度減緩；同時卡鉑模型組大鼠的尿及腎臟組織的腎損傷分子-1的含量較正常對照組在損傷6h便明顯升高（P<0.05），早于腎小管上皮細胞的形態(tài)學變化時間，并

5、且隨病程延長腎小管上皮細胞損傷加重濃度逐漸升高；實時定量 PCR顯示 Kim-1基因的表達量較正常組明顯明顯上調，在腎小管細胞出現自我修復時仍維持在較高的表達水平，可能與促進腎小管細胞的修復有關；HE染色也表現出明顯腎損傷，3d時損傷達到高峰，5d時可見腎小管上皮細胞的自我修復；鹽酸乙酰左卡尼汀干預組的大鼠較卡鉑模型組肌酐升高緩慢（P<0.05），病理提示同時間段腎損傷較其減輕，尿及腎臟組織的腎損傷分子-1的含量也明顯降低（P<0.05

6、），實時定量 PCR提示較同時間段卡鉑模型組 Kim-1基因表達量下調。在卡鉑導致的腎損傷大鼠中血清腎損傷分子-1測定無明顯升高，同時經過分析提示各組及各個時間點大鼠之間無明顯差異（P>0.05）。
　　結論：1、卡鉑可引起大鼠以腎小管損害為主的急性腎損傷，并且隨時間延長其損傷呈加重趨勢；2、在卡鉑導致的大鼠急性腎損傷中，3d為重要的轉折點，在此時間點腎組織損傷達到高峰；3、卡鉑導致的急性腎損傷過程中，腎損傷分子-1表達在6小時便