辛伐他汀對哮喘大鼠Th1-Th2平衡及MMP-9、TIMP-1表達的影響.pdf

1、目的：觀察辛伐他汀對哮喘大鼠Th1/Th2平衡及MMP-9、TIMP-1表達的影響。建立大鼠哮喘模型，以血清IFN-γ、1L-4水平反映Th1/Th2水平，作為氣道炎癥監(jiān)測指標，并以肺組織MMP-9、TIMP-1水平作為另一監(jiān)測指標來反映氣道重塑，通過觀察辛伐他汀干預(yù)后IFN-γ、1L-4及MMP-9、TIMP-1水平的變化，探討辛伐他汀對哮喘氣道炎癥及重塑的作用，同時探討不同劑量辛伐他汀對哮喘氣道炎癥及重塑的干預(yù)效果，為臨床哮喘的防治

2、提供除激素外的新途徑。
　　方法：40只6周齡健康雄性SD大鼠隨機分為五組，每組八只：對照組、哮喘組、辛伐他汀20mg/kg治療組(S1)、辛伐他汀40mg/kg治療組(S2)、辛伐他汀60mg/kg治療組(S3)。除對照組外，其余各組分別于實驗第1、8天對大鼠腹腔注射OVA100mg和氫氧化鋁100mg(混于9g/L鹽水2ml中)進行致敏，第15天起將大鼠置于自制密閉霧化箱內(nèi)吸入OVA，濃度由1％、1.5％、2％、2.5％、3％

3、遞增進行激發(fā)，每4次后增加一次OVA濃度，每次30分，隔日一次，共20次。對照組以等量生理鹽水替代，方法同上。辛伐他汀20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg治療組在每次激發(fā)前0.5小時分別予以辛伐他汀生理鹽水混懸液20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg灌胃給藥。于末次激發(fā)24小時后麻醉，采用肺功能檢測各組大鼠基礎(chǔ)呼氣峰值及乙酰膽堿激發(fā)后呼氣峰值變化反映氣道阻力變化，后處死大鼠，取各組大鼠血清、支氣管肺泡灌洗液(BALF)

4、及肺組織，測定BALF中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞(EOS)、淋巴細胞(Lym)、中性粒細胞數(shù)(Neu)，ELISA法檢測血清中IFN-γ及1L-4水平。部分肺組織行蘇木精一伊紅染色觀察，圖像分析系統(tǒng)測定氣管壁厚度，部分行馬松染色觀察膠原沉積，部分肺組織免疫組化測定MMP-9及TIMP-1在氣道的表達。
　　結(jié)果：成功建立大鼠哮喘模型，和其他組相比，哮喘組肺組織HE染色可見氣管及血管周圍炎癥細胞明顯增多，支氣管粘膜破壞，氣道壁增厚，馬

5、松染色顯示氣道及血管周圍大量膠原沉積；肺功能檢測顯示隨乙酰膽堿激發(fā)濃度增加，哮喘組呼氣峰值明顯降低，即隨乙酰膽堿激發(fā)濃度增加，哮喘組氣道阻力明顯升高；哮喘組BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性細胞、淋巴細胞、中性粒細胞及血清中1L-4水平均增高，IFN-γ水平下降，氣道MMP-9和TIMP-1的表達增加，MMP-9/TIMP-1下降(P<0.01)。與哮喘組相比，辛伐他汀各組氣管及血管周圍炎癥細胞浸潤、膠原沉積量及注射乙酰膽堿后呼氣峰值變化均較哮

6、喘組有改善，BALF中炎癥細胞數(shù)減少及血清IL-4水平下降，IFN-γ水平上升，氣道MMP-9和TIMP-1的表達均下降，MMP-9/TIMP-1增加，辛伐他汀60mg/kg治療組優(yōu)于20mg/kg治療組(P<0.01)。相關(guān)分析顯示哮喘組MMP-9與TIMP-1及1L-4水平正相關(guān)，與IFN-γ負相關(guān)；TIMP-1與氣管壁厚度及膠原沉積正相關(guān)，與基礎(chǔ)氣道壓力負相關(guān)；MMP-9/TIMP-1與氣管壁厚度、膠原沉積負相關(guān)，與基礎(chǔ)氣道壓力正

7、相關(guān)(P<0.01)，辛伐他汀治療組MMP-9與1L-4水平正相關(guān)，與IFN-γ負相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論：辛伐他汀可提高IFN-γ，降低IL-4水平，具有增強Th1、抑制Th2細胞反應(yīng)的作用，調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡，減輕氣道炎癥，可能是辛伐他汀治療哮喘的機制之一；辛伐他汀可通過調(diào)節(jié)MMP-9/TIMP-1平衡來預(yù)防、減輕氣道重塑，這一過程有可能是通過提高IFN-γ，降低IL-4水平，從而下調(diào)MMP-9水平間接影響TIMP