雞眼草的生藥學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 雞眼草(Kummerowia striata(Thunb.) Schindle.)為豆科雞眼草屬雞眼草的全草。黃酮類化合物為雞眼草的主要活性成分。中藥雞眼草性味甘淡涼，臨床上用于治療嬰幼兒輪狀病毒腸炎及嬰幼兒遷延性慢性腹瀉，療效顯著。
　　 本文旨在對(duì)雞眼草進(jìn)行生藥學(xué)研究，包括雞眼草的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、雞眼草止瀉藥理作用研究、雞眼草抗菌活性組分的篩選和雞眼草總黃酮的提取工藝研究四方面。
　　 方法：

2、r>　　 一、雞眼草的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　 采用性狀鑒別和葉、莖橫切面及粉末的顯微鑒別方法鑒別雞眼草。采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定雞眼草中染料木素和山奈酚的含量，色譜柱:DiamonsC18(迪馬公司，4.6mn×250mm，5μm)，流動(dòng)相:甲醇-0.1％磷酸(72(∶)28)，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長370nm。采用高效液相色譜法測(cè)定雞眼草中木犀草苷的含量，色譜柱:DiamonsC18(迪馬公司，4.6mm×250

3、mm，5μm)，流動(dòng)相:乙腈-0.1％磷酸水溶液梯度洗脫，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長350nm。
　　 二、雞眼草止瀉藥理作用研究
　　 構(gòu)建小鼠慢性腹瀉模型，除模型組和陰性對(duì)照組外，進(jìn)行藥物治療，觀察雞眼草對(duì)番瀉葉所致小鼠腹瀉的影響;運(yùn)用炭末推進(jìn)法觀察雞眼草對(duì)小鼠小腸蠕動(dòng)功能的影響。
　　 三、雞眼草抗菌活性組分的篩選
　　 高效液相色譜法分析經(jīng)過大孔樹脂的不同濃度的乙醇洗脫液，山奈酚、木犀草

4、苷、染料木素三種化合物作為對(duì)照品，通過色譜圖比較各組分化學(xué)成分的差異。運(yùn)用連續(xù)稀釋法測(cè)定不同濃度的乙醇洗脫液對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA)的最低抑菌濃度(MinimumInhibitory Concentration，MIC)。通過比較各組分MIC值的不同，找出有效抗菌的組分。掃描式電子顯微鏡(Scanning Electron Micros

5、cope，SEM)下觀察MRSA在不同MIC值溶液中的形態(tài)。
　　 四、雞眼草總黃酮的提取工藝研究
　　 單因素實(shí)驗(yàn):考察藥液流速、乙醇洗脫液濃度、上樣液濃度對(duì)大孔樹脂吸附效果的影響。根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化提取工藝。
　　 結(jié)果：
　　 雞眼草的藥材性狀、顯微鑒別特征明顯，采用高效液相色譜法測(cè)定了雞眼草中染料木素、山奈酚、木犀草苷三種化合物的含量，方法可靠、重復(fù)性好。
　　 雞眼草

6、低中高劑量組對(duì)番瀉葉所致小鼠腹瀉有明顯的治療作用，雞眼草高劑量組療效與中藥陽性對(duì)照組、化學(xué)藥陽性對(duì)照組相當(dāng);雞眼草中高劑量組對(duì)小鼠小腸有顯著的抑制推動(dòng)的作用。
　　 70％乙醇洗脫的組分黃酮含量在各組分中最高，其MIC最小，SEM下可觀察到金黃色葡萄球菌在70％組分的不同的MIC溶液中細(xì)胞壁已破壞，細(xì)胞壁邊緣不規(guī)則。
　　 確定了雞眼草總黃酮的優(yōu)化提取工藝為:藥液流速為3mL/min，乙醇洗脫液濃度60％，上樣液濃度為0