利用合成多肽制備兔多克隆抗體.pdf

1、人類基因組計(jì)劃完成后，功能基因組學(xué)成為主要研究方向，而抗體在基因的結(jié)構(gòu)與功能研究中具有十分重要的作用，制備高效價(jià)的抗體是示蹤新基因的表達(dá)和研究新基因功能的首要前提。單克隆抗體雖然特異性好，但其制備復(fù)雜費(fèi)時(shí)，兔多克隆抗體的制備則簡(jiǎn)單、快速，便于科研工作的有效開(kāi)展。 目的：通過(guò)以合成多肽為抗原來(lái)制備兔多克隆抗體，并優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，為今后實(shí)驗(yàn)室多克隆抗體制備實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化建立初步基礎(chǔ)。 方法：本研究以生物信息學(xué)軟件來(lái)分析蛋白序列

2、選擇抗原表位后，通過(guò)Fmoc法固相合成相應(yīng)的多肽，經(jīng)過(guò)液相色譜純化及質(zhì)譜儀鑒定合成正確后，與KLH蛋白偶聯(lián)免疫新西蘭雄兔，多次加強(qiáng)免疫后獲得血清，并進(jìn)行ELISA或Western Blot檢測(cè)。 結(jié)果：成功合成并純化了43條多肽，并在免疫后能夠得到所需多克隆抗體。 結(jié)論：以合成多肽制備兔多克隆抗體可在本實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立完成，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室實(shí)際條件，歸納總結(jié)了完整的多克隆抗體制備流程，為今后實(shí)驗(yàn)室抗體制備的產(chǎn)業(yè)化建立了一定基礎(chǔ)。