一株中度嗜鹽菌JLT-09的生物學(xué)特性初步研究.pdf

1、學(xué)校代碼：—102—00分類號(hào)：Q墮研究生學(xué)號(hào)：密級(jí)：玉⑨東牡知予冠大堇碩士學(xué)位論文一株中度嗜鹽菌JLT_09的生物掌特性初步研究StudyonBiologicalcharacteristicsofmoderatelyhalophilicbacteriaofJLrr_09指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向?qū)W位類型作者：張艷艷劉東波副教授微生物學(xué)極端微生物學(xué)學(xué)歷碩士東北師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)2011年5月摘要從中國(guó)內(nèi)蒙古吉蘭泰鹽湖的湖水樣品中得到一

2、株產(chǎn)堿性蛋白酶的嗜鹽菌(最適生長(zhǎng)鹽濃度為8％一10％左右)，在此基礎(chǔ)上對(duì)它進(jìn)行了傳統(tǒng)表型特征研究，包括形態(tài)學(xué)觀察及生理生化特征的研究，此外，還對(duì)其進(jìn)行了16SrDNA序列分析，結(jié)合以上研究初步鑒定該菌是喜鹽芽孢桿菌屬的一個(gè)新菌株，并且為中度嗜鹽菌，命名為HalobacillusspJLT09。表型分析顯示該菌株呈桿狀，革蘭氏陰性，有芽孢，無(wú)莢膜，無(wú)鞭毛，菌落呈現(xiàn)乳白色表面光滑濕潤(rùn)，菌落邊緣不是很規(guī)則圓滑。最適生長(zhǎng)鹽濃度是8％10％，最適

3、生長(zhǎng)Mg濃度是3％，最適生長(zhǎng)pH是8，最適生長(zhǎng)溫度是30℃35℃。能利用山梨醇、蔗糖、甘露醇為唯一碳源生長(zhǎng)，但是不能利用葡萄糖、麥芽糖、木糖、淀粉、乳糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖，果糖為唯一碳源。MR實(shí)驗(yàn)和VP實(shí)驗(yàn)測(cè)定為陰性，檸檬酸鹽利用實(shí)驗(yàn)測(cè)定為陰性，硝酸鹽和亞硝酸鹽還原反應(yīng)為陰性，不產(chǎn)H2S，該菌株不具有淀粉酶、脲酶、酯酶活性，但過(guò)氧化氫酶反應(yīng)為陽(yáng)性，能產(chǎn)生蛋白酶。對(duì)此菌株產(chǎn)蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明，在以干酪素為碳

4、源和氮源的情況下，當(dāng)培養(yǎng)基的初始pH為8，培養(yǎng)溫度為30℃，接種量為O5％，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)時(shí)，培養(yǎng)基的產(chǎn)酶條件最佳。對(duì)該菌發(fā)酵液進(jìn)行低溫離心、抽濾、超濾、凍干，得到粗酶液，對(duì)該粗酶液的性質(zhì)進(jìn)行研究，結(jié)果表明：酶的最適反應(yīng)溫度為60攝氏度，此酶的熱穩(wěn)定性不好，當(dāng)溫度高于60攝氏度時(shí)，酶活基本喪失。該酶在pH為810的范圍內(nèi)酶活最高，在DH為610之間相對(duì)酶活較高，但低于6或者高于11時(shí)相對(duì)酶活下降較多，因此該酶有一定的耐堿性質(zhì)，屬堿性蛋