好氧聚磷菌的分離、鑒定及其聚磷特性的研究.pdf

1、本研究利用YG培養(yǎng)基從巢潮底泥、校園池塘底泥和南淝河底泥等不同地點(diǎn)采集的污泥中分離純化了66株細(xì)菌,其中30株細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛,將這些菌株分別點(diǎn)種到限磷與過(guò)磷的葡萄糖-MOPS培養(yǎng)基上培養(yǎng)2d,在兩種培養(yǎng)基上都產(chǎn)生藍(lán)斑的菌株有11株,即為初選聚磷菌。將這11株細(xì)菌進(jìn)行厭氧好氧連續(xù)培養(yǎng),進(jìn)行內(nèi)聚物的染色,其中有7株細(xì)菌能合成內(nèi)聚-β-羥基丁酸和多聚磷酸鹽；好氧培養(yǎng)24時(shí),在7株能合成內(nèi)聚-β-羥基丁酸和多聚磷酸鹽的菌株體內(nèi)含磷量均超過(guò)對(duì)照菌大

2、腸桿菌,其中GP44的菌體含磷量高達(dá)11.92％,本文將對(duì)菌株GP44進(jìn)一步的研究。 菌株GP44的個(gè)體形態(tài)為鏈桿狀,無(wú)鞭毛,有莢膜,革蘭氏染色陰性,大小為0.75 μm×2.25 μ m,菌落邊緣平整,不透明,濕潤(rùn),呈卵黃色,有臭味。16SrDNA序列分析表明,GP44的16SrDNA基因序列與Klebsiella terrigena ATCC 33257T(AF129442)同源性高達(dá)(96％)。通過(guò)系統(tǒng)進(jìn)化樹分析和生理生化

3、特征,GP44屬于腸桿菌科克雷伯氏菌屬中土生克雷伯氏菌(K.terrigena)。 菌株GP44除磷的最佳培養(yǎng)基為廢水合成培養(yǎng)基,生長(zhǎng)曲線中菌株的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期在第4h到第16h,在除磷變化曲線中菌株在第24h除磷效率達(dá)到最高,此時(shí)為測(cè)定除磷效率最佳時(shí)期。本文研究了非營(yíng)養(yǎng)因素溫度、pH值和溶氧量對(duì)菌株GP44除磷效率影響,溫度在20～35℃的范圍內(nèi),菌株的生長(zhǎng)對(duì)除磷的效果變化不是很大,除磷效果最佳的溫度為30℃。在溫度為30℃條件下

4、,溶氧量和pH對(duì)菌株GP44的除磷效果影響較顯著,最佳裝液量為120mL·250mL-1,pH為7.5時(shí)生長(zhǎng)狀況和除磷效果最佳。營(yíng)養(yǎng)因素碳源、氮源和金屬離子對(duì)菌株GP44的生長(zhǎng)和除磷效果影響的研究表明,最適碳源和氮源分別為為葡萄糖和酵母膏,除磷效率為59.12％；Mg2+、K2+和Fe3+促進(jìn)菌株GP44的生物除磷,但Fe3+對(duì)菌株的生長(zhǎng)有一定抑制作用,Mn2+、Cu2+、Pb2+、Co2+和Zn2+對(duì)菌株生長(zhǎng)和除磷效果均有抑制作用,其

5、他金屬離子對(duì)菌株的生長(zhǎng)和除磷效果影響不明顯。正交實(shí)驗(yàn)獲得最佳除磷效果組合為：以廢水合成培養(yǎng)基為基礎(chǔ),葡萄糖0.5g·L-1,pH值為7.5,裝液量為120mL·250mL-1,培養(yǎng)溫度為30℃,四因素對(duì)生物除磷效果影響的順序：溶氧量>pH>碳源>溫度。 菌株GP44在厭氧好氧循環(huán)連續(xù)培養(yǎng)時(shí)表現(xiàn)出厭氧釋磷好氧吸磷的特性,厭氧培養(yǎng)6h釋磷量為5.19 mg·L-1,好氧培養(yǎng)12h吸磷量12.34 mg·L-1。培養(yǎng)液中的磷濃度對(duì)菌株