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文檔簡介
1、第一部分、不同胚胎期心外膜祖細(xì)胞的體外培養(yǎng)
目前通過胚胎小鼠心室爬片獲得心外膜祖細(xì)胞的胚胎期并不統(tǒng)一,E10.5-E13.5胚胎心室都有用來培養(yǎng)心外膜祖細(xì)胞。
目的:探討如何成功培養(yǎng)不同胚胎期的心外膜祖細(xì)胞。
方法:我們選擇E11.5、E13.5、E15.5胚胎小鼠心室來誘導(dǎo)心外膜祖細(xì)胞的爬出,并通過PCR和免疫細(xì)胞熒光鑒定其性質(zhì)。
結(jié)果:從E11.5、E13.5、E15.5胚胎心室成功培養(yǎng)出心外
2、膜祖細(xì)胞。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細(xì)胞爬出需要不同培養(yǎng)時(shí)間窗。
結(jié)論:可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪m宜地選擇不同胚胎期的心室來培養(yǎng)心外膜祖細(xì)胞。
第二部分、探究不同胚胎期心外膜祖細(xì)胞之間生物學(xué)特性的差異
從心外膜早期形成到成年,心外膜細(xì)胞一直經(jīng)歷著胚胎期基因表達(dá)的動態(tài)變化,與其相聯(lián)系的是心外膜細(xì)胞特性的改變。目前研究尚未明確各胚胎期心外膜祖細(xì)胞的生物學(xué)特性差異,而該差異可能對心外膜祖細(xì)胞相關(guān)的實(shí)
3、驗(yàn)研究存在影響。
目的:探究不同胚胎期的心外膜祖細(xì)胞生物學(xué)特性的差異。
方法:通過劃痕實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞周期分析以及PDGF-BB誘導(dǎo)分別研究不同胚胎期心外膜祖細(xì)胞的遷移、增殖及分化特性的差異。
結(jié)果:E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細(xì)胞的遷移能力隨胚胎發(fā)育不斷降低。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細(xì)胞的增殖能力總體上無差別。早期心外膜細(xì)胞較晚期心外膜細(xì)胞更容易表達(dá)平滑肌標(biāo)志物,其祖細(xì)胞特性
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