轉(zhuǎn)基因食品溯源管理與歐盟轉(zhuǎn)基因大米檢測(cè)方法評(píng)價(jià).pdf

1、轉(zhuǎn)基因作物是一類通過(guò)基因工程將外源目的基因片段轉(zhuǎn)入到原有作物的基因組中，從而得到帶有特殊性狀的作物。1983年全球第一例轉(zhuǎn)基因煙草在美國(guó)問(wèn)世，1996年美國(guó)最早開(kāi)始商業(yè)化生產(chǎn)和銷售的轉(zhuǎn)基因作物。自美國(guó)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因作物的研究開(kāi)始以來(lái)，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）審批的轉(zhuǎn)基因作物品種已有40余種。目前，中國(guó)沒(méi)有批準(zhǔn)轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植。
　　2005年以來(lái)，中國(guó)出口歐盟大米中

2、屢屢被檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因成分。歐盟委員會(huì)于2008年發(fā)布2008/289/EC（3）號(hào)決議批準(zhǔn)針對(duì)米制品中的非法轉(zhuǎn)基因成分轉(zhuǎn)cry1A(b/c)基因抗蟲雜交稻組合Bt汕優(yōu)63（Bt63）采取緊急措施。根據(jù)決定要求，產(chǎn)品進(jìn)入市場(chǎng)前，經(jīng)營(yíng)者應(yīng)向相關(guān)機(jī)構(gòu)提交一份官方檢測(cè)報(bào)告，證明米制品中無(wú)Bt63轉(zhuǎn)基因成分污染的檢測(cè)報(bào)告。此外，該決議還規(guī)定成員國(guó)對(duì)于進(jìn)口及已投放歐盟市場(chǎng)的米制品需隨機(jī)抽樣并按照2008/289/EC（3）號(hào)決議指定的方法檢測(cè)分析，以

3、確保不含有轉(zhuǎn)基因成分。歐盟委員會(huì)于2011年又通過(guò)了2011/884/EU決議，此決議擴(kuò)大了2008/289/EC決議所規(guī)定措施的范圍，從只針對(duì)Bt63轉(zhuǎn)基因水稻成分，擴(kuò)大到任何轉(zhuǎn)基因成分，致使中國(guó)出口歐盟大米多次發(fā)生被拒收、退貨、撤銷合同等事件，造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。
　　為了更好的對(duì)轉(zhuǎn)基因進(jìn)行管理，在建立優(yōu)化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品溯源是實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因嚴(yán)格管理的重要途徑之一。
　　EAN?UCC系統(tǒng)是對(duì)產(chǎn)品

4、進(jìn)行溯源的一個(gè)重要手段。EAN?UCC全球統(tǒng)一標(biāo)識(shí)系統(tǒng)是國(guó)際物品編碼協(xié)會(huì)（Globe Standard1，GS1）統(tǒng)一制定。目前，中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)按照EAN·UCC系統(tǒng)的規(guī)則進(jìn)行編碼。UCC/EAN-128條碼是由國(guó)際物品編碼協(xié)會(huì)共同制定的一種特定的條碼符號(hào)，具有應(yīng)用成熟和全球開(kāi)放的優(yōu)越性。
　　本研究對(duì)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品從產(chǎn)地、產(chǎn)品、采收、加工、包裝、倉(cāng)儲(chǔ)、運(yùn)輸、銷售8個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行信息收集，并根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定相應(yīng)編碼規(guī)則對(duì)這8個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行UC

5、C/EAN-128碼的設(shè)計(jì)與編碼，建立轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品UCC/EAN-128碼的框架及規(guī)則，在國(guó)內(nèi)首次對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行了UCC/EAN-128編碼研究。通過(guò)掃描條形碼，獲取相關(guān)數(shù)據(jù)，并將獲得數(shù)據(jù)與計(jì)算機(jī)建立的數(shù)據(jù)庫(kù)相結(jié)合，進(jìn)行信息讀取，可以了解轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的生產(chǎn)、加工、包裝等信息,從而對(duì)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品進(jìn)行有效的溯源。
　　本課題以轉(zhuǎn)基因棉花、棉籽粕、棉籽油為材料，根據(jù)UCC/EAN–128碼的編碼規(guī)則及框架，對(duì)轉(zhuǎn)基因籽棉種植、產(chǎn)

6、品、加工、運(yùn)輸、倉(cāng)儲(chǔ)、銷售6個(gè)主要環(huán)節(jié)進(jìn)行信息收集與UCC/EAN–128碼的編碼。根據(jù)《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識(shí)管理辦法》的規(guī)定,在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標(biāo)簽上進(jìn)行標(biāo)識(shí)，確定了設(shè)計(jì)編碼的可操作性。
　　本研究以出口年糕和白粿干為材料，根據(jù)UCC/EAN-128碼的編碼規(guī)則，對(duì)非轉(zhuǎn)基因大米種植、產(chǎn)品、加工、運(yùn)輸、倉(cāng)儲(chǔ)、銷售6個(gè)主要環(huán)節(jié)進(jìn)行信息收集，并在產(chǎn)品編碼中加入非轉(zhuǎn)基因編碼進(jìn)行標(biāo)識(shí)，從而對(duì)非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進(jìn)行溯源，從其產(chǎn)品編碼可迅速識(shí)別

7、轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品或非轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品。一旦產(chǎn)品被檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因成分，可以通過(guò)解讀UCC/EAN-128條碼得到的信息，追溯出水稻種子來(lái)源、播種日期、收割、大米碾磨、年糕和白粿干加工、包裝和倉(cāng)儲(chǔ)等日期和批次，查出問(wèn)題出現(xiàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，并且通過(guò)對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)的留存樣品進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)予以證實(shí)，為米制品的可追溯性提供技術(shù)保障。UCC/EAN－128條碼可以通過(guò)在米制品包裝上加貼條形碼標(biāo)簽來(lái)施行，成本低廉，易于推廣。
　　本研究采集了6個(gè)國(guó)家和地區(qū)的76個(gè)

8、大米及大米制品樣品，使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀對(duì)歐盟決議2011/884/EU提出的兩種轉(zhuǎn)基因大米檢測(cè)方法—熒光染料法（SYBR Green實(shí)時(shí)熒光PCR法）和雙重探針?lè)ǎ═aqMan實(shí)時(shí)熒光PCR法）及歐盟決議2008/289/EU的轉(zhuǎn)基因大米檢測(cè)方法—探針?lè)ǎ═aqMan實(shí)時(shí)熒光PCR法）進(jìn)行了比較研究。取樣、DNA提取及PCR反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照歐盟檢測(cè)方法進(jìn)行，對(duì)每一大米樣品進(jìn)行以上三種方法的檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了比較分析，從而對(duì)

9、對(duì)三種檢測(cè)方法進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，76份大米及米制品中，采用2011/884/EU SYBR Green方法檢測(cè)出有23.68％（18/76）樣品為陽(yáng)性。同時(shí)采用2011/884/EU TaqMan雙重實(shí)時(shí)熒光PCR方法和2008/289/EC TaqMan實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)，只有5.26%（4/76）的樣品為陽(yáng)性。采用2011/884/EU決議指定的SYBR Green實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)的陽(yáng)性率高于該決議指定的另一種方法雙重Ta

10、qMan實(shí)時(shí)熒光PCR和2008/289/EC指定的方法TaqMan實(shí)時(shí)熒光PCR。本研究還分別采用不同試劑（Fast SYBR Green試劑和Power SYBR Green試劑）、不同儀器（實(shí)時(shí)熒光PCR儀ABI Viia7和實(shí)時(shí)熒光PCR儀ABI7300）對(duì)同一樣品進(jìn)行了檢測(cè)研究，并分別對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　本課題根據(jù)UCC/EAN-128碼的規(guī)則建立了對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品與非轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行溯源的方法，為我國(guó)實(shí)施轉(zhuǎn)基