農(nóng)桿菌介導(dǎo)荔枝(litchichinensissonn.)遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及導(dǎo)入leafy基因研究

1、福建農(nóng)林大學(xué)博士學(xué)位論文農(nóng)桿菌介導(dǎo)荔枝(Litchi chinensis Sonn.)遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及導(dǎo)入LEAFY基因研究姓名：曾黎輝申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：呂柳新2001.8.1福建農(nóng)林大學(xué)博士論文3 ．建立農(nóng)桿菌介導(dǎo)荔枝遺傳轉(zhuǎn)化體系。以荔枝胚性愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體，超致病力菌株E H A l 0 5 侵染，G 4 1 8 作為轉(zhuǎn)化細(xì)胞的選擇劑，抗性愈傷組織通過體胚發(fā)生再生植株。采用抗性愈傷組織、體胚發(fā)生、體胚萌

2、發(fā)三個(gè)步驟的嚴(yán)格篩選避免嵌合體的產(chǎn)生。4 ．利用中間表達(dá)載體p B l l 2 i 構(gòu)建L F Y 基因帶有植物組成型啟動(dòng)子一C a M V 3 5 S 的植物表達(dá)載體p B I L F Y 。通過三親交配法將p B I L F Y 導(dǎo)入農(nóng)桿菌菌株E H A l 0 5 。5 ．將L F Y 基因?qū)肜笾Α霸t”品種，獲得轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)P C R —S o u t h e r n 雜交檢測土證明外源基因已整合到三株轉(zhuǎn)基因植株基因組中。(