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文檔簡介
1、雙股DNA病毒,,雙股DNA病毒,痘病毒科:雞痘病毒 綿羊痘病毒 山羊痘病毒 粘液瘤病毒非洲豬瘟病毒科:非洲豬瘟病毒皰疹病毒科:偽狂犬病毒、禽傳染性喉氣管炎病毒、馬立克病毒、鴨瘟病毒腺病毒科:犬傳染性肝炎病毒、產(chǎn)蛋下降綜合癥病毒,,雙股DNA病毒是指:基因組核酸為雙股DNA的病毒。主要包括以下病毒:非洲豬瘟病毒科與虹彩病毒科皰疹病毒科腺病毒科多瘤病毒科與乳頭瘤病毒科嗜肝DNA病毒科桿狀病毒科:為昆蟲及甲殼動物的
2、病毒其中痘病毒科、非洲豬瘟病毒科、皰疹病毒科、腺病毒科包含了獸醫(yī)學(xué)上重要的病毒病原,,,一、生物學(xué)特性共同 1、形態(tài): (1)多為磚形(250nm×250nm×200nm);少數(shù)為卵圓形(260nm×160nm) —副痘;,(2)衣殼中含類脂與管狀或球管狀的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),稱為DNA芯髓,芯髓之旁為兩個側(cè)體,具有囊膜。,,2、主要特性:(1)基因組——單分子的線狀雙股DNA,約200kb;
3、(2)細胞漿內(nèi)復(fù)制;(3)主要以胞漿膜出芽方式釋放并獲得囊膜; ?。?)能在上皮細胞漿中形成胞漿包涵體。,,特殊:1.雞痘病毒:某些毒株具有血凝素:雞、其它禽類、綿羊等的紅細胞。2.綿羊痘?、山羊痘沒有血凝性,,二、抵抗力:共同(1)怕熱:55℃,20min或37℃,24h喪失感染力; ?。?)怕日光和紫外線: 可迅速滅活;(3)抗冷,抗干燥; ?。?)病灶干痘痂,毒力可保存幾個月。,,
4、三、抗原性1.山羊痘病毒、綿羊痘病毒?、 粘液瘤病毒、雞痘病毒:1個血清型 2.山羊痘病毒、綿羊痘病毒之間存在共同抗原。,,四、致病性1、雞痘病毒 可分為三種病型,即皮膚型、白喉型和混合型?! 、?皮膚型:在雞冠、肉髯和眼皮等處,產(chǎn)生一種特殊的痘子?! 、?白喉型:主要在口腔和咽喉部分,先在粘膜上生成一種黃白色小結(jié)節(jié),后逐漸融合形成一層黃白色干酪樣的假膜。,,,2、綿羊痘病毒 ?。?)致病性:自然條件下只感染綿
5、羊,致全身性皰疹,肺常出現(xiàn)特征性干酪性結(jié)節(jié),各種綿羊?qū)d羊痘病毒的易感性不同,死亡率5~50%不等。人由于直接接觸病羊污染的物質(zhì)也可感染。,,3、山羊痘病毒 在自然條件下僅感染山羊,表現(xiàn)為發(fā)熱、有粘液性、膿性鼻漏及全身性皮膚丘疹。,,4、粘液瘤病毒 致病性:野兔、家兔都非常易感。兔感染48h后出現(xiàn)臨床癥狀,首先眼結(jié)膜炎,接著頭部廣泛腫脹,呈特征性的“獅子頭”,嚴重者體溫升高到42℃,多在48h死亡。澳大利亞曾引入此病毒,以圖消滅
6、過剩的野生家兔。,,五、培養(yǎng):共同 (1)10~12日齡雞胚絨尿膜接種;多數(shù)在膜上可形成痘斑,痘病毒的種類不同,痘斑的形態(tài)、顏色、大小以及形成時間也不同。 ?。?)雞胚成纖維細胞培養(yǎng),產(chǎn)生CPE,并形成空斑。,,特殊1、綿羊痘病毒:可在雞胚絨毛尿囊膜上、綿羊、山羊、犢牛睪丸細胞培養(yǎng)中生長,并產(chǎn)生明顯的CPE。2、粘液瘤病毒:雞胚絨毛尿囊膜,3d后產(chǎn)生直徑0.5~1.0mm的圓形痘皰。3、雞痘病毒:易在雞胚絨毛尿囊膜上生長,
7、并可于3天內(nèi)產(chǎn)生白色隆起的大型痘斑。,,六、診斷共同 ?。?)病毒分離:采取無菌的清朗庖液或取痘斑研磨后,加雙抗處理后,雞胚絨毛尿囊膜接種,在37℃ 孵育5~7d,可見絨尿膜上形成增生性、壞死性痘皰。 ?。?)病理切片:將絨尿膜固定制作切片,用蘇木素和伊紅染色,在上皮細胞的胞漿內(nèi)可以見到嗜酸性包涵體。,,七、預(yù)防1、雞痘:目前主要采用雞痘疫苗進行預(yù)防?! 、?雞痘活疫苗:用于35日齡以上的幼雞,對雛雞有一定的毒力?! ?/p>
8、 ?、?鴿痘活疫苗:毒力比雞痘疫苗弱,用于1日齡雛雞和產(chǎn)蛋母雞,一般采用毛囊接種法?! 、?雞痘鵪鶉化活疫苗:毒力很低,雛雞使用安全,效果良好。 2、綿羊痘病毒 :定期接種疫苗,常用羊痘氫氧化鋁苗或雞胚化羊痘弱毒疫苗。,非洲豬瘟病毒科與虹彩病毒科,虹彩病毒科:分為4個屬,其中2個屬與魚類和兩棲類疾病相關(guān)。 非洲豬瘟病毒科:僅有一個成員,即非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)?! ∵@兩
9、科的病毒均為:線狀雙股DNA,20面體對稱,有囊膜。,非洲豬瘟病毒,1、致病性:為非洲豬瘟的病原體:僅家豬易感;以急性高熱為特征,全身出血,病程短,死亡率高; 由呼吸道入侵→扁桃體和鼻粘膜附近淋巴結(jié)增殖→血流(病毒血癥,紅細胞及白細胞中含毒)。,,2、病毒的生物學(xué)特點 ?。?)球形,175~215nm; ?。?)雙股DNA,20面體對稱,有囊膜?! 。?)是唯一已知的核酸為DNA的蟲媒病毒。,,(4)血細胞吸附現(xiàn)象:
10、 白細胞感染ASFV后,表面有一種病毒特異抗原,能吸附正常豬的紅細胞,這種可被抗本病毒的免疫血清所抑制; 血細胞吸附試驗具有毒株特異性。,,3、血清型:1個,,4、培養(yǎng): ?。?)初始分離的ASFV僅在豬單核細胞和巨噬細胞中復(fù)制; ?。?)適應(yīng)后可在豬腎細胞(PK15)、Vero細胞等生長。,,5、IE推薦的診斷方法(1)病毒分離和鑒定; (2)血細胞吸附實驗:可區(qū)別非洲豬瘟與豬瘟;(3)直接
11、熒光抗體試驗檢測抗原; ?。?)病毒基因的PCR檢測。,,6、免疫 本病毒各個毒株之間免疫原性很低,對同株的免疫力也是短暫的,目前尚無有效疫苗可用?! ∽⒁猓何覈壳皼]有非洲豬瘟,必須嚴加防范!,皰疹病毒科,一組具有包膜的DNA病毒。 該科病毒均為:線狀雙股DNA,20面體對稱,有囊膜。,一、主要生物學(xué)特征共同 1、基因組為單分子線狀雙股DNA,約125~235kb。 2、直徑150nm,162個殼粒組成的20面
12、體對稱,有囊膜,囊膜上有糖蛋白的纖突。,,3、病毒衣殼在細胞核內(nèi)復(fù)制和裝配,可形成巨大的包涵體,后經(jīng)核膜以芽生方式獲得囊膜;目前尚不明確如何通過細胞質(zhì)。,,特殊馬立克病病毒MDV?。?)分類地位:皰疹病毒甲亞科成員,又名禽皰疹病毒2型。?。?)病毒生物學(xué)特性:基因組為線狀雙股DNA,大小166~184kb,為傳染性核酸;病毒核衣殼20面體對稱。 ① 裸露的MDV:直徑85~100nm,常見于感染細胞的核內(nèi),胞漿中偶爾也可看到
13、。 ?、?有囊膜的MDV:直徑150~160nm,主要見于核膜和核泡,有時見于胞漿。 ③ 羽囊上皮內(nèi)的病毒子:直徑達273~400nm,呈不規(guī)則的無定形結(jié)構(gòu)。,,,,偽狂犬病毒能夠凝集小白鼠紅細胞禽傳染性喉氣管炎無血凝性 鴨瘟病毒無血凝特性 馬立克氏病毒無血凝特性 ?,,二、致病性1、偽狂犬病毒 ?、?豬為原始宿主,也可感染馬、牛、綿羊、山羊及多種野生動物。 ② 主要癥狀成年豬多為隱性感染,少數(shù)出現(xiàn)輕微發(fā)熱和神經(jīng)
14、癥狀; 幼豬感染后呈發(fā)熱、麻痹、昏迷等癥狀,死亡率很高;懷孕母豬——流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎; 其它動物感染后死亡率很高,特征癥狀為體軀某部奇癢。,,偽狂犬病毒,偽狂犬病毒,偽狂犬病毒,,(3) 病毒分布與動物排毒情況 ① 病毒分布:最初位于扁桃體,感染24hr內(nèi)可從頭部神經(jīng)節(jié)、脊髓及橋腦中分離到病毒 ?、?排毒:康復(fù)豬可通過鼻腔分泌物及唾液持續(xù)排毒,但糞、尿不帶毒。,,2、禽傳染性喉氣管炎病毒 ?、?自
15、然感染對象為雞;各種年齡雞均可被感染,僅以成年雞的癥狀最典型??祻?fù)雞可部分成為帶毒雞,成為傳染的來源。,,② 主要癥狀:病雞呈現(xiàn)呼吸困難和咳出血性滲出物;產(chǎn)蛋下降,蛋殼褪色,產(chǎn)軟殼蛋。 ③ 主要病變:主要發(fā)生在喉頭和氣管部分,氣管黏膜腫脹、出血、壞死和形成糜爛,氣管內(nèi)的血樣或黃白色滲出物 。,,,3.馬立克病毒 ① MDV為細胞結(jié)合性病毒,靶細胞——T淋巴細胞。 ② 主要感染雞和火雞,鵪鶉、稚雞、鷓鴣也能感染。以淋巴細胞增生和腫
16、瘤形成為特征,潛伏期較長。一般以2~3月齡的雞發(fā)病最為嚴重。根據(jù)病變發(fā)生的主要部位和臨診癥狀,可分為4種致病類型:神經(jīng)型(古典型) 內(nèi)臟型(急性) 眼型 皮膚型,馬立克病病毒,神經(jīng)型(古典型),馬立克病病毒,內(nèi)臟型(急性),眼型,馬立克病病毒,皮膚型,馬立克病病毒,,傳染性 ?、?感染雞群的墊料和羽毛具有傳染性:含有從羽囊上皮細胞來的病毒,傳染性在室溫可保持4~8個月,在4℃至少保持10年,但常用化學(xué)消毒劑作用10min就能
17、使之滅活。 ?、?不能垂直傳播。,,4、鴨瘟病毒① 以消化道感染為主。主要引起1月齡以上成年鴨的鴨瘟;也可感染鵝和其他雁形目禽類?!、?病鴨肝、脾、腦、食道和泄殖腔等組織含毒量最高。 ?、?主要癥狀:高熱,兩腳麻痹,腹瀉,排出綠色稀糞,流淚和頭頸部腫大,俗稱“大頭瘟”;病鴨表現(xiàn)為腸炎、脈管炎、廣泛的局灶性壞死,產(chǎn)蛋率下降25~40%,發(fā)病率5~100%,死亡率很高(病鴨多數(shù)死亡)。,,,,抵抗力2、禽傳染性喉氣管炎病毒 ?、?/p>
18、 對熱敏感,-20~-60℃或凍干條件下可長期保存,至少10年; ?、?對一般消毒藥抵抗力不強。在3%來蘇兒或1%苛性鈉溶液中,不到1min即死亡。,,(3)抵抗力2、禽傳染性喉氣管炎病毒 ?、?對熱敏感,-20~-60℃或凍干條件下可長期保存,至少10年; ?、?對一般消毒藥抵抗力不強。在3%來蘇兒或1%苛性鈉溶液中,不到1min即死亡。,,三、抗原性1、偽狂犬病毒:PRV只有1個血清型,但毒株間存在差異。2、禽傳染性喉氣
19、管炎病毒:僅1個血清型3、鴨瘟病毒:1個血清型,,3.馬立克病毒: 毒株分類:分為血清1、2、3型 ① 血清1型:包括所有致瘤強弱不同的致瘤毒株 致弱株——荷蘭CVI988/Rispens株、英國HRPS-16/att株、美國Md11/75C株、我國的“814”株等。 低毒力株——Cu-2株、K株等; 中等毒力株——B14株等; 高毒力株——JM株、GA株、HPRS-16株、北
20、京-1株等; 超強毒株——Md/5株、RB1/B株等; 特超強毒株——如584A株等。 ?、?血清2型:包括所有的不致瘤毒株,SB1,301 B/1,Z4(江蘇農(nóng)學(xué)院)。 ?、?血清3型:包括所有的火雞皰疹病毒,如:FC-126,LS等。,,四、 病毒培養(yǎng)1、偽狂犬病毒 ?、?易在雞胚絨毛尿囊膜上生長,接種后3-4d能形成大小不一的隆起的白色痘斑 ② 可在細胞培養(yǎng)中生長: 兔、豬和倉鼠的腎細胞
21、(可產(chǎn)生CPE和空斑,形成包涵體);兔和豚鼠睪丸細胞;雞胚成纖維細胞。,,2、禽傳染性喉氣管炎病毒① 僅能在雞胚復(fù)制:絨尿膜接種,在絨毛尿囊膜上形成大小不等的灰白色痘斑 ?、?能在雞胚肝、腎和肺細胞上繁殖,并引起CPE,,,3、馬立克病毒 ?、?雞胚培養(yǎng):卵黃囊接種4日齡雞胚,18日齡左右可看到絨尿膜上形成白色痘皰,從針尖大到直徑1~2 mm不等。 ?、?細胞培養(yǎng):雛雞腎細胞(CK)和鴨胚成纖維細胞(DEF)適于MDV1型的
22、初次分離,適應(yīng)后可在雞胚成纖維細胞(CEF)上生長,并產(chǎn)生CPE;2型和3型MDV在CEF上生長良好。4、鴨瘟病毒:鴨胚尿囊腔、雞胚成纖維細胞,,五、 微生物學(xué)診斷 1、偽狂犬病毒?、?動物試驗:1~2mL適當(dāng)稀釋的病腦組織懸液皮下接種兔;2~5d后于接種部位出現(xiàn)奇癢癥狀,最后麻痹致死。,,② 病毒分離:常用豬腎細胞系(PK-15),病毒接種后24~72h,出現(xiàn)CPE(細胞層折光性↑,最后脫落,形成合胞體)。③ 病毒鑒定:可用
23、特異性抗血清做中和試驗、免疫熒光試驗鑒定病毒; ELISA(國際貿(mào)易指定試驗):能迅速檢測大量樣品; PCR技術(shù):鑒定偽狂犬病毒,多用于隱性感染。,,2、禽傳染性喉氣管炎病毒 ① 病毒分離 病料采集:發(fā)病早期的氣管滲出物、氣管粘膜及肺組織。 雞胚接種:絨尿膜接種,第3d開始形成痘斑, 5~6d死亡。 雛雞接種:易感雛雞接種后3~4d出現(xiàn)明顯的癥狀和病變。,,② 病毒鑒定:常用的方法有中
24、和試驗、熒光抗體檢查、空斑減少試驗。③ 鑒別診斷:傳支、傳鼻、雞敗血支原體病相區(qū)別:取病雞氣管滲出物或其他含毒組織病料,涂擦易感雞泄殖腔粘膜,4~5d后觀察涂擦部位是否出現(xiàn)紅腫等炎癥反應(yīng)。,,3、馬立克病毒 ?、?采集病料與病毒分離:用病雞的腫瘤組織或抗凝血作為接種材料;分離1型病毒用DEF或CK 細胞單層,分離2型、3型用CEF單層?! 、?血清學(xué)試驗:常用瓊擴試驗;流行期,常用高免血清檢測病雞羽囊上皮中的病毒,流行后期,可用已
25、知病毒抗原檢查病雞血清中的抗體?! 、?熒光抗體試驗,,4、鴨瘟病毒① 禽胚接種:絨尿膜接種9~14日齡鴨胚,4d后死亡,胚體表面輕度充血和小點出血,絨尿膜水腫增厚并有灰白色壞死灶,肝臟表面有特征性灰白色或灰黃色針頭大壞死灶。雞胚內(nèi)不能生長。 ② 能在DEF中生長,自第6代起可引起明顯的細胞病變,形成核內(nèi)包涵體和空斑。③ 動物接種:無菌病料接種易感小鴨和免疫對照鴨;前者死亡而后者不感染,即可確診。,,六、預(yù)防1、偽狂犬病毒滅
26、活苗→弱毒苗→基因缺失苗,在計劃根除偽狂犬病的國家,可選用此類疫苗。,,2、禽傳染性喉氣管炎病毒 疫苗接種(從未發(fā)生過本病的地區(qū),不宜進行疫苗接種)① 中等毒力疫苗:泄殖腔黏膜涂擦 ② 弱毒疫苗:滴鼻或滴眼 ?、?油乳劑滅活苗,80-100日齡接種1次即可,,3、馬立克病毒: 1日齡雛雞免疫接種,,4、鴨瘟病毒 ?、?免疫接種:鴨瘟鴨胚化弱毒疫苗、鴨瘟雞胚化弱毒疫苗?! 、?防止帶毒野生水禽進入鴨群。,腺病毒科,一、
27、分類 哺乳動物腺病毒屬(Mastadenovirus)和禽類腺病毒屬(Aviadenovirus) 動物腺病毒及其所致疾病,二、一般特性共同 各種動物的腺病毒形態(tài)基本相同,衣殼結(jié)構(gòu)清晰,易在電子顯微鏡下仔細觀察,在感染細胞核內(nèi)的病毒粒子經(jīng)常排列成結(jié)晶狀。而且腺病毒的核酸和蛋白質(zhì)又易分離提取,故是目前動物病毒中在形態(tài)和化學(xué)結(jié)構(gòu)上研究得最為詳細的病毒之一。,1、腺病毒沒有囊膜,球形2、核衣殼的直徑為70~80nm,呈二十面體立體對
28、稱。3、內(nèi)為線狀的雙股DNA。4、向外伸出的纖突。血凝素也在球部,可凝集大白鼠、恒河猴或禽類紅細胞,為型特異性抗原所在部位。,,5、在細胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、核內(nèi)裝配;通過細胞裂解釋放。,,特殊1、減蛋綜合征病毒(EDS76)血凝性:能凝集雞及其他禽類的紅細胞2、犬傳染性肝炎病毒血凝性:犬傳染性肝炎病毒能凝集人"O"型、豚鼠和雞的紅細胞,不凝集大鼠、小鼠、豬、犬、羊、馬、牛、兔的紅細胞.利用這種特性可進行血凝抑
29、制試驗.,,二、抵抗力共同1、腺病毒對酸的抵抗力較強,腺病毒對酸穩(wěn)定,適宜pH為6~9,能耐pH3~5,pH在2以下和10以上不穩(wěn)定。能通過胃腸道而繼續(xù)保持活性。2、由于沒有脂質(zhì)囊膜,對乙醚、氯仿有抵抗力,但在丙酮中不穩(wěn)定。3、腺病毒對溫度的耐受范圍較寬,在冷凍狀態(tài)下保存非常穩(wěn)定,于4℃存活70天,22~23℃—14天,36℃—7天;但50℃經(jīng)10~20分鐘或56℃ 2.5~5分鐘,,三、致病性共同1、傳播以糞—口為主途徑,
30、也可通過呼吸道或污染物品傳播。 2、病毒在咽、結(jié)膜尤其是小腸上皮細胞內(nèi)增殖,偶爾波及其他臟器,隱性感染常見。 3、疾病一般為自限性,感染后可獲得長期持續(xù)的型特異性免疫力,中和抗體損傷作用重要。,,1、減蛋綜合征病毒(EDS76):最早分離于1976年,除雞外,家鴨、野鴨及鵝也發(fā)病。(1)產(chǎn)蛋母雞的產(chǎn)蛋量下降和蛋的質(zhì)量降低——危害種、蛋雞 的重要傳染病之一。 ① 產(chǎn)蛋下降一般持續(xù)4~10w逐漸恢復(fù) ?、?蛋色變淡、蛋殼粗
31、糙不平,軟殼蛋、薄殼蛋、破蛋。 ?。?)人工感染1日齡雛雞,到7日齡前后出現(xiàn)精神萎頓和腹瀉,并有少數(shù)幼雛雞發(fā)生死亡。,,2、犬傳染性肝炎病毒:種急性、高度接觸性敗血性傳染病,俗稱為犬藍眼病.臨床上以體溫升高、黃疸、貧血和角膜混濁為特征;病理上以肝小葉中心壞死、肝實質(zhì)細胞和皮質(zhì)細胞內(nèi)出現(xiàn)包涵體和出血時間延長為特征.,,,四、抗原性:共同哺乳動物腺病毒有共同的可溶性補體結(jié)合性抗原。某些腺病毒具有T抗原,可利用免疫沉淀試驗在由腺病毒引起
32、腫瘤的動物血清中檢測到,意味著某些腺病毒與腫瘤原性相關(guān)。,,1、減蛋綜合征病毒(EDS76)具有三種基因型 (1)第一種引起經(jīng)典的EDS,許多國家均有發(fā)生;(2)第二種僅發(fā)生于英國的鴨;(3)第三種發(fā)生于澳大利亞的雞。血清型:1種血清型。2、犬傳染性肝炎病毒:1和2型,,五、培養(yǎng)1、減蛋綜合征病毒(EDS76)(1)在鴨胚和鵝胚上復(fù)制的滴度高于雞胚?!。?)能在鴨及鵝胚的腎細胞、肝細胞、成纖維細胞上復(fù)制,并產(chǎn)生CPE(細胞
33、腫脹、變圓、聚集成葡萄串狀)。,,2、犬傳染性肝炎病毒CAV可在原代犬、豬、雪貂、豚鼠、浣熊的腎和睪丸細胞以及MDCK(犬腎細胞)細胞上增殖.細胞病變?yōu)樵龃?、變圓、變亮、聚集成葡萄串狀.,,六、微生物學(xué)檢查共同1、病毒分離:采取標(biāo)本,迅速接種敏感細胞,根據(jù)特征性細胞病變及抗原性鑒定病毒。大多數(shù)腺病毒具有比較嚴格的宿主動物范圍。一種動物的腺病毒一般不感染異種動物。而且在組織培養(yǎng)細胞中,也以該宿主動物來源的細胞最為敏感,上皮樣細胞似
34、乎比纖維樣細胞更為敏感。故在腺病毒的分離培養(yǎng)中,通常應(yīng)用宿主動物來源的原代、繼代或傳代細胞(主要是腎細胞)。但在連續(xù)傳代后,??蛇m應(yīng)其它動物來源的細胞培養(yǎng)物,,2、血清學(xué)檢查:取急性期和恢復(fù)期血清進行補體結(jié)合試驗,抗體升高4倍或以上,可判斷為近期感染。3、中和試驗和血凝抑制試驗可定型別。,,1、減蛋綜合征病毒(EDS76)?。?)病毒分離:病料采集和處理;鴨胚接種?!。?)病毒鑒定:血凝和血凝抑制試驗。,,2、犬傳染性肝炎病毒
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