血管內(nèi)皮抑素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549及人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的抑制作用及機(jī)制探討.pdf

1、目的： 探討血管內(nèi)皮抑素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的作用及其可能的機(jī)制，為臨床應(yīng)用血管內(nèi)皮抑素治療肺癌提供理論依據(jù)。 方法： 1.MTT法檢測(cè)不同濃度(10、20、30、40、50μg/ml，48h)血管內(nèi)皮抑素對(duì)A549細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞的影響；檢測(cè)相同濃度(30μg/ml)血管內(nèi)皮抑素作用不同時(shí)間(24、48、72h)對(duì)A549細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞的影響。 2.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)

2、(FCM)檢測(cè)血管內(nèi)皮抑素(30μg/ml，48h)對(duì)A549細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞的細(xì)胞周期及凋亡的影響。 3.ELISA法檢測(cè)不同濃度血管內(nèi)皮抑素(20、30、40μg/ml，48h)對(duì)A549細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞上清液中VEGF表達(dá)的影響。 4.RT-PCR法檢測(cè)血管內(nèi)皮抑素(30μg/ml，48h)對(duì)A549細(xì)胞中Survivin基因表達(dá)的影響。 結(jié)果： 1.MTT檢測(cè)，血管內(nèi)皮抑素(20、30、4

3、0、50μg/ml)能有效抑制人肺腺癌細(xì)胞A549和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的增殖(P<0.05)，該抑制效應(yīng)具有時(shí)間-劑量依賴性。 2.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)，A549細(xì)胞與HUVEC細(xì)胞血管內(nèi)皮抑素(30μg/ml，48h)作用后均出現(xiàn)細(xì)胞周期的阻滯與凋亡改變。 3.ELISA法檢測(cè)，血管內(nèi)皮抑素(20、30、40μg/ml，48h)能抑制A549細(xì)胞及HUVEC細(xì)胞VEGF的表達(dá)，該抑制效應(yīng)具有藥物濃度依賴性。

4、 4.RT-PCR結(jié)果，與對(duì)照組(0μg/ml，48h)相比較血管內(nèi)皮抑素(30μg/ml，48h)作用組能抑制A549細(xì)胞Survivin基因的表達(dá)，差異有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論： 1.血管內(nèi)皮抑素能抑制人肺腺癌細(xì)胞A549和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的增殖，該抑制效應(yīng)具有時(shí)間-劑量依賴性。 2.血管內(nèi)皮抑素抑制人肺腺癌細(xì)胞A549和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC增殖的機(jī)制為阻滯細(xì)胞周期及誘導(dǎo)細(xì)胞凋