轉(zhuǎn)FasL基因DC的體外培養(yǎng)、鑒定及其對(duì)異體移植的胰島細(xì)胞的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：用本室構(gòu)建的FasL重組慢病毒載體感染大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞來(lái)源的樹突狀細(xì)胞(DC)，Western blot檢測(cè)感染后FasL蛋白表達(dá)；分離、鑒定大鼠胰島細(xì)胞并行同種異體胰島細(xì)胞移植，觀察FasLDC對(duì)異體移植的胰島細(xì)胞存活的影響。為進(jìn)一步研究轉(zhuǎn)基因DC在器官移植中誘導(dǎo)免疫耐受，保護(hù)移植物奠定基礎(chǔ)。 方法： 1．提取健康成年SD大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞，rrGM-CSF和rrIL-4共同刺激促進(jìn)其分化為：DC；7天后收

2、集懸浮細(xì)胞，作形態(tài)學(xué)及功能學(xué)鑒定。 2．用FasL重組慢病毒載體感染DC，72h后Westem blot檢測(cè)DC FasL蛋白表達(dá)。 3．制作大鼠糖尿病模型，分離、鑒定大鼠胰島細(xì)胞并行異體胰島細(xì)胞腎包膜下移植，移植術(shù)前分別給予生理鹽水、空白載體DC及FasLDCl×10<’6>；異體胰島細(xì)胞移植后每天監(jiān)測(cè)血糖。 結(jié)果： 1．大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞來(lái)源的：DC在體外培養(yǎng)7天后完全成熟。 2．Weste

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