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文檔簡介
1、以急性髓細(xì)胞(AML)白血病細(xì)胞株HL60和慢性髓細(xì)胞(CML)人紅白血病細(xì)胞株K562為模型,建立了多烯紫杉醇誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡體系.通過比較多烯紫杉醇誘導(dǎo)兩種細(xì)胞凋亡及產(chǎn)生活性氧(ROS)的差異以及兩種細(xì)胞抗氧化體系的變化,進(jìn)一步研究了兩種細(xì)胞產(chǎn)生的ROS與凋亡的關(guān)系.同時(shí),以K562為對(duì)象,建立了多烯紫杉醇誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的數(shù)學(xué)模型.結(jié)果顯示,①多烯紫杉醇對(duì)兩種細(xì)胞的抑制作用具有濃度依賴性和時(shí)間依賴性;②K562對(duì)藥物作用的響
2、應(yīng)時(shí)間比HL60延后24h,表現(xiàn)出一定的耐藥性;③多烯紫杉醇誘導(dǎo)HL60產(chǎn)生ROS,在24h達(dá)到高峰,同時(shí)O2-在24h后大量分泌在細(xì)胞外并在36小時(shí)到高峰;④多烯紫杉醇引起HL60胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性顯著變化.⑤DPI、CAT和NAC的加入能顯著降低HL60細(xì)胞的凋亡率.DMSO的加入沒有顯著變化.結(jié)果表明K562細(xì)胞具有很好的抗氧化防御體系,能及時(shí)清除由多烯紫杉醇誘導(dǎo)產(chǎn)生的ROS,從而降低了對(duì)細(xì)胞的
3、毒性;和K562相比,HL60抗氧化防御體較弱.多烯紫杉醇引起HL60胞內(nèi)ROS的急劇上升,產(chǎn)生的ROS反過來又參與了細(xì)胞的凋亡.參與細(xì)胞凋亡的ROS的主要成分為O2-和H2O2.流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示,多烯紫杉醇作用下,K562總細(xì)胞數(shù)以及各個(gè)周期的細(xì)胞總是以指數(shù)的形式增長或衰退,同時(shí)出現(xiàn)m期的積累和凋亡.數(shù)學(xué)模型結(jié)果表明能夠引起K562細(xì)胞m期積累的最大多烯紫杉醇濃度為17.9631nM;能誘導(dǎo)凋亡的最大藥物濃度為7.8192nM.m期
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