從噬菌體展示肽庫中篩選CCR5膜外第一胞外環(huán)(ECL-1)的結合肽及其抗炎作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：本文研究從噬菌體隨機七肽庫中篩選CCR5膜外第一胞外環(huán)(ECL-1)的結合多肽及其該多肽對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。 方法：首先，以ECL-1為靶分子進行親和篩選，共進行三輪“吸附-洗脫-擴增”的篩選過程，隨機挑取三輪篩選后的單個噬菌體克隆進行ELISA分析，挑選陽性克隆進行DNA測序，合成外源多肽，通過小鼠耳片的腫脹程度和HE染色來觀察該多肽對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。 結果：經(jīng)三輪篩選后隨機挑取的15個噬菌體克

2、隆均為陽性，與ECL-1具有高親和力，且這些陽性噬菌體克隆經(jīng)DNA測序后含有共同的外源氨插入的基酸序列。合成的多肽和篩選得到的陽性噬菌體克隆均可顯著減輕二甲苯導致的小鼠耳朵水腫、充血和炎性細胞的浸潤。 討論：采用噬菌體隨機七肽庫我們獲得了能與ECL-1具有高親和力陽性噬菌體克隆和多肽，它們能明顯抑制炎癥早期的滲出、水腫、炎性細胞浸潤，其抗炎機制可能是阻斷了CCR5與其配體的結合，從而抑制了白細胞的浸潤和游走。本研究為炎癥的靶向治

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