細胞自噬在葒草苷治療心肌梗死大鼠中的作用機制研究.pdf

1、目的：
　　 建立冠脈結(jié)扎致大鼠心肌梗死(myocardialinfarction，MI)模型，研究葒草苷（orientin，Ori）對MI大鼠的治療作用，旨在為Ori的開發(fā)研究提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 結(jié)扎Wistar雄性大鼠左冠狀動脈前降支(ligatingtheleftanteriordescendingcoronaryartery，LAD)建立MI模型，24小時后存活且符合標(biāo)準的大鼠44只，隨機

2、分成模型組(Model，n=12)、白藜蘆醇組(resveratrol，Res)(2.5mg/kg，n=7)、葒草苷小劑量組（1.0mg/kgOri，n=8）、中劑量組（2.0mg/kgOri，n=10）和大劑量組(4.0mg/kgOri，n＝7)，另設(shè)假手術(shù)組(Sham，n＝11)。腹腔注射給藥21天后，末次給藥30min后采用16導(dǎo)生理記錄儀采集心電圖（electrocardiogram，ECG）、血流動力學(xué)指標(biāo);濕重法記錄心臟重量

3、、左心室重量以及肺臟重量;比色法檢測血清肌酸肌酶同工酶（creatinekinase-MB，CK-MB）活性，血清超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）活性和谷胱甘肽酶(glutathione，GSH)活性;光鏡觀察大鼠心肌組織的病理學(xué)改變;電鏡觀察大鼠心肌組織的超微結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.LAD能引起大鼠ST段明顯抬高，模型組大鼠ST段高度變化與假手術(shù)組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.0

4、01);并導(dǎo)致左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)及左室收縮指數(shù)（contractionindex，CI）降低，左室舒張末期壓（leftventricularenddiastolicpressure，LVEDP）、左室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）及左室心肌松弛時間常數(shù)(T)升高，與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01或P＜0.001vs.Sham);模型組大鼠CK-MB活性顯著升高，與假手術(shù)組比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0

5、.05vs.Sham）：模型組大鼠心臟重量及心臟/體重指數(shù)，左室重量指數(shù)、肺臟/體重指數(shù)升高(P＜0.05或P＜0.01vs.Sham);模型組大鼠血清SOD和GSH活性顯著降低，與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.001vs.Sham);光鏡觀察與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌梗死區(qū)變薄，結(jié)構(gòu)紊亂，纖維化增加，大量炎性細胞浸潤，心肌纖維變性壞死，毛細血管擴張，心肌細胞間質(zhì)水腫等;電鏡觀察模型組大鼠與假手術(shù)組比較，肌原纖維

6、部分溶解，肌膜線粒體膜破損明顯，可見線粒體腫脹，嵴排列紊亂，局部或整個線粒體嵴斷裂溶解和空泡化，局部核膜破壞。
　　 2.腹腔注射1.0mg/kgOri連續(xù)21天，對大鼠ST段高度變化無明顯改善，與模型組比較無顯著差異(P＞0.05vs.Mod);治療性腹腔注射2.0mg/kgOri和4.0mg/kgOri連續(xù)21天，可使大鼠ST段高度變化從(0.164±0.022)mV降低至(0.059±0.028)mV和(0.046±0.0

7、24)mV(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod)。腹腔注射Ori（1.0mg/kg，2.0mg/kg，4.0mg/kg）可改善大鼠血流動力學(xué)參數(shù)，2.0mg/kg及4.0mg/kgOri可使+dp/dtmax從（2185±494）mmHg/s分別升高至(5634±391)mmHg/s和（5824±1106）mmHg/s，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01或P＜0.01vs.Mod)，使Cl從（65±15）s-1分別升高至（81±

8、5）s-1和（93±20）s-1，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod)，使-dp/dtmax從(-1782±127)mmHg/s分別降低至（-4957±917）mmHg/s、(-5553±550)mmHg/s以及(-5783±797)mmHg/s，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01vs.Mod)，并使T值從(0.037±0.013)s分別降低至（0.025±0.004）s、(0.024±0.007)s及

9、(0.021±0.009)s，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod);腹腔注射4.0mg/kgOri還可使LVEDP從（20±3）mmHg降低至（11±2）mmHg，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05vs.Mod)。腹腔注射4.0mg/kgOri可改善模型組大鼠的重量指數(shù)，使心臟重量由（1.20±0.09）g下降至(0.98±0.14)g(P＜0.05vs.Mod);腹腔注射2.0mg/kgOri和4.0

10、mg/kgOri可使心臟/體重比例由（3.65±0.01）下降至（3.35±0.12）、（3.26±0.08）mg/g(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod)，左室重量指數(shù)由(0.36±0.02)g/g降低至(0.31±0.02)g/g以及（0.29±0.02）g/g(P＜0.05或P＜0.01vs.Mod)，肺臟重量指數(shù)由（4.82±0.34）mg/g降低至（4.27±0.45）mg/g以及（3.63±0.24）mg/g(P＜0.0

11、5或P＜0.01vs.Mod)，而各組大鼠在體重、左心室重量方面并無差別(P＞0.05）。
　　 3.與模型組比較，連續(xù)21天腹腔注射Ori(1.0mg/kg，2.0mg/kg和4.0mg/kg)可降低大鼠血清心肌酶CK-MB水平，2.0mg/kgOri和4.0mg/kgOri可使血清CK-MB活性從(476±98)U/L降低至(359±51)U/L及(351±6)U/L，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05vs.Mod);連

12、續(xù)21天腹腔注射Ori（1.0mg/kg，2.0mg/kg及4.0mg/kg）可升高大鼠血清抗氧化酶水平，4.0mg/kgOri可使血清SOD活性從（63±17）U/mg升高至(98±4)U/mg，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01vs.Mod);使GSH活性從（12±1）μmol/L分別升高至（17±2）μmol/L，與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.001vs.Mod)。
　　 4.與模型組比較，HE染色切片下觀察發(fā)現(xiàn)，