ICC-RT—PCR半定量分析法檢測(cè)甲型肝炎病毒（HAV）減毒活疫苗感染性滴度的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本研究對(duì)快速檢測(cè)甲肝病毒減毒活疫苗感染性滴度方法的建立進(jìn)行了探索。我們采用聯(lián)合細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)建立了以細(xì)胞培養(yǎng)/逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Integratedcellculture/reversetranscriptase-polymerasechainreaction;ICC/RT-PCR)及凝膠掃描半定量分析來檢測(cè)甲肝減毒活疫苗滴度，并與LgCCID50法的結(jié)果作了比較，建立了一種快速、靈敏、特異地檢測(cè)甲肝病毒減毒活疫苗感染

2、性滴度的方法。ICC/RT-PCR法結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)法與分子生物學(xué)方法的優(yōu)點(diǎn)，可將疫苗感染性滴度的檢測(cè)時(shí)間由LgCCID50法的一個(gè)月左右縮短到1周左右。感染性甲肝病毒滴度為7.50LgCCID50/ml的甲肝病毒疫苗參考品經(jīng)ICC/RT-PCR半定量分析法在第4天后檢測(cè)到的滴度為7.67，而經(jīng)滅活的參考品在10。稀釋度未產(chǎn)生陽性結(jié)果，表明該法有著較好的靈敏度和特異性。用該法檢測(cè)疫苗樣品，在培養(yǎng)時(shí)間為4天的結(jié)果與目前常用的細(xì)胞培養(yǎng)法(Lg

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