醋丁洛爾與美托洛爾對(duì)THP-1泡沫化細(xì)胞功能影響差別的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:以THP-1細(xì)胞構(gòu)建的人類巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型為研究對(duì)象,并進(jìn)一步探討具有內(nèi)在擬交感活性的β腎上腺能受體阻滯劑醋丁洛爾和無(wú)內(nèi)在擬交感活性的β腎上腺能受體阻滯劑美托洛爾,對(duì)人類巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型功能影響的差別,從理論上探討兩種不同β受體阻滯劑在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)不同療效的原因。
　　方法:(1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)人的急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株( THP-1細(xì)胞株),建立經(jīng)典公認(rèn)、穩(wěn)定可靠的人類巨噬細(xì)胞源性泡沫

2、細(xì)胞模型。(2)建立異丙腎上腺素組、美托洛爾+異丙腎上腺素組、醋丁洛爾+異丙腎上腺素組,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆謩e用不同濃度梯度的異丙腎上腺素、美托洛爾、醋丁洛爾處理THP-1細(xì)胞,從而形成相關(guān)組別的亞組。(3)應(yīng)用Western Blot技術(shù)檢測(cè)各組THP-1細(xì)胞CCR2表達(dá)量的變化。應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)各組THP-1細(xì)胞MCP-1的量的變化。利用Transwell小室檢測(cè)不同藥物處理后THP-1細(xì)胞的遷移能力變化。
　　結(jié)果:

3、　　(1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)人的急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株(THP-1細(xì)胞株),建立了經(jīng)典公認(rèn)、穩(wěn)定可靠的人類巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型。
　　(2) Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1)異丙腎上腺素組:異丙腎上腺素處理的THP-1細(xì)胞,CCR2的表達(dá)水平顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05),且濃度越高,CCR2表達(dá)量越大,呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細(xì)胞經(jīng)美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素升高CC

4、R2表達(dá)的作用,且隨著美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素升高CCR2表達(dá)的作用越強(qiáng)(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經(jīng)醋丁洛爾預(yù)處理的THP-1細(xì)胞,再用異丙腎上腺素處理CCR2的升高與只用異丙腎上腺素刺激引起的CCR2升高,沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時(shí),隨預(yù)處理的醋丁洛爾濃度升高,CCR2有升高趨勢(shì),但三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　(3) ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1)異丙腎上腺素組:

5、異丙腎上腺素處理的THP-1細(xì)胞, MCP-1的水平顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05),且濃度越高,MCP-1量越大,呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細(xì)胞經(jīng)美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素升高M(jìn)CP-1的作用,且隨著美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素升高M(jìn)CP-1的作用越強(qiáng)(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經(jīng)醋丁洛爾預(yù)處理的THP-1細(xì)胞,再用異丙腎上腺素處理MCP-1的升高與只用異丙腎上腺素刺激引起的M

6、CP-1升高,沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時(shí),隨預(yù)處理的醋丁洛爾濃度升高,MCP-1有升高趨勢(shì),但三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　(4) Transwell實(shí)驗(yàn)表明:1)異丙腎上腺素組:異丙腎上腺素處理的THP-1細(xì)胞,細(xì)胞遷移能力較空白對(duì)照組顯著增強(qiáng)(P<0.05),且濃度越高,遷移能力越強(qiáng),呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細(xì)胞經(jīng)美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素增強(qiáng)遷移能力的作用,且隨著

7、美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素增強(qiáng)遷移能力的作用越強(qiáng)(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經(jīng)醋丁洛爾預(yù)處理的THP-1細(xì)胞,再用異丙腎上腺素處理遷移能力的增強(qiáng)與只用異丙腎上腺素刺激引起的遷移能力增強(qiáng),沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時(shí),隨預(yù)處理的醋丁洛爾濃度升高,遷移能力有增強(qiáng)的趨勢(shì),但三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:異丙腎上腺素能夠上調(diào)THP-1細(xì)胞CCR2蛋白的表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞MCP-