高遷移率組蛋白1(HMGB1)參與良性前列腺增生合并慢性前列腺炎癥的發(fā)生.pdf

1、背景和目的：
　　良性前列腺增生是目前老年男性最常見(jiàn)的泌尿系疾病之一，其主要癥狀包括尿頻、尿細(xì)、尿急、排尿不暢等泌尿系梗阻癥狀，其引起的尿潴留甚至腎積水、腎功能不全等問(wèn)題一直困擾著許多人。目前，前列腺增生的治療取得了較大的進(jìn)展，但是其機(jī)制研究仍然相對(duì)滯后，既往認(rèn)為年齡及雄激素是影響本病最關(guān)鍵的兩個(gè)因素，并出現(xiàn)了阻斷雄激素進(jìn)而改善癥狀的藥物，但是大量的病例資料及前期研究證實(shí)前列腺增生是許多因素共同作用的結(jié)果，其中慢性前列腺炎作為前列

2、腺增生基礎(chǔ)的說(shuō)法得到了許多研究結(jié)果的支持。本研究的目的是探討高遷移率組蛋白1（HMGB1）作為潛在的致炎因子在良性前列腺增生癥（BPH）疾病進(jìn)展中的作用，并通過(guò)此次研究對(duì)BPH的作用機(jī)理進(jìn)行進(jìn)一步深入研究，為前列腺增生的預(yù)防及治療提供新的思路。
　　方法：
　　從鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科2014年3月到2015年6月的患者中根據(jù)嚴(yán)格的納入排出標(biāo)準(zhǔn)，選取符合要求的研究對(duì)象共160例，并根據(jù)術(shù)后病理結(jié)果將其分為單純前列腺增生

3、組和前列腺增生合并慢性前列腺炎組。其中納入標(biāo)準(zhǔn)主要是結(jié)合患者癥狀、體征、影像學(xué)表現(xiàn)、尿動(dòng)力學(xué)功能學(xué)檢查結(jié)果等。排出標(biāo)準(zhǔn)主要為具有前列腺手術(shù)病史、下尿路侵入性操作病史及強(qiáng)烈懷疑前列腺癌等情況。對(duì)所有患者的前列腺體積大小、PSA水平、及I-PSS評(píng)分指數(shù)進(jìn)行了詳細(xì)的測(cè)量、統(tǒng)計(jì)及分析。其中，前列腺體積采取以經(jīng)腹部及經(jīng)直腸彩色多普勒超聲檢測(cè)為主，磁共振（MRI）檢測(cè)為輔的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。PSA水平檢測(cè)通過(guò)血液檢測(cè)進(jìn)行，如果PSA檢測(cè)時(shí)機(jī)不合規(guī)定，結(jié)果

4、應(yīng)視為無(wú)效，必要時(shí)需重復(fù)采集。所有納入本次實(shí)驗(yàn)的病人均行經(jīng)尿道前列腺切除術(shù)（TURP），術(shù)后均行病理檢查。運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)（Immunohistochemistry，IHC）和蛋白印記法（Western blotting，WB）分別檢測(cè)了160例患者的前列腺組織中HMGB1表達(dá)水平。之后我們通過(guò)體外前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)方法獲得0，3，6，12，24和48小時(shí)的組織細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)。通過(guò)蛋白印記法和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme li

5、nked immunosorbent assay，Elisa）技術(shù)分別檢測(cè)了0，3，6，12，24和48小時(shí) HMGB1在前列腺上皮細(xì)胞以及周圍培養(yǎng)基中的表達(dá)水平。同時(shí)我們采用羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（Carboxyfluorescein succinimidyl ester dilution assay，CSFE）法檢測(cè)細(xì)胞的增殖水平。最后，我們運(yùn)用 t檢驗(yàn)、單向或雙向方差分析檢驗(yàn)，用于檢驗(yàn)相關(guān)因素在不同組別之間的數(shù)據(jù)差異，運(yùn)用Spea

6、rman相關(guān)分析方法來(lái)分析前列腺組織HMGB1蛋白表達(dá)與相關(guān)臨床因素之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　通過(guò)對(duì)納入實(shí)驗(yàn)的160例患者術(shù)后病理檢查我們最后發(fā)現(xiàn)160例患者中有86例診斷為BPH合并慢性前列腺炎，而74例診斷為單純性BPH。免疫組化技術(shù)和蛋白印記法結(jié)果顯示，HMGB1在前列腺增生合并前列腺炎患者中的表達(dá)水平較單純前列腺增生患者中表達(dá)水平更高(P<0.05)。同時(shí)基于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行的Spearman相關(guān)分析結(jié)果表明，慢性前

7、列腺炎合并前列腺增生患者組中，HMGB1的表達(dá)水平與前列腺體積大小具有一定的相關(guān)性(P<0.05)，與年齡及I-PPS評(píng)分無(wú)明顯相關(guān)性。而在單純前列腺增生組 HMGB1表達(dá)水平與前列腺體積、年齡及I-PPS評(píng)分均無(wú)明顯相關(guān)。體外前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)后的蛋白印記法和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定結(jié)果顯示，在致炎物脂多糖（LPS）作用后，前列腺上皮細(xì)胞的HMGB1表達(dá)及釋放至周圍培養(yǎng)基的作用明顯增強(qiáng)，且在24小時(shí)達(dá)到頂峰，隨后出現(xiàn)下降。此外，在LPS刺激下

8、，HMGB1的過(guò)表達(dá)促進(jìn)了前列腺上皮細(xì)胞的增殖，而這種增殖作用可以被HMGB1的拮抗劑boxA所抑制。
　　結(jié)論：
　　HMGB1在良性前列腺增生合并前列腺炎時(shí)比單獨(dú)良性前列腺增生時(shí)表達(dá)水平更高；BPH合并慢性前列腺炎時(shí)，HMGB1蛋白表達(dá)可能與前列腺增生具有一定關(guān)聯(lián)性；炎癥可能誘導(dǎo)HMGB1的表達(dá)及從細(xì)胞內(nèi)釋放，這反過(guò)來(lái)又會(huì)促進(jìn)前列腺上皮細(xì)胞的增殖，從而導(dǎo)致前列腺增生；HMGB1作為潛在致炎物質(zhì)在前列腺增生合并慢性前列腺炎