衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體及沙眼衣原體的作用研究.pdf

1、沙眼衣原體泌尿生殖道感染是世界上最常見(jiàn)的性傳播疾病。隨著細(xì)菌耐藥性及持續(xù)感染問(wèn)題的產(chǎn)生，沙眼衣原體感染的治療變得愈來(lái)愈棘手，加之衣原體的特殊生物學(xué)特性，臨床治療失敗的例子越來(lái)越多。衣原體疫苗的研究尚未取得滿意的結(jié)果。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外的研究開(kāi)始轉(zhuǎn)向衣原體噬菌體，我們前期的相關(guān)研究表明，作為第二個(gè)被發(fā)現(xiàn)的衣原體噬菌體，豚鼠結(jié)膜炎衣原體噬菌體phiCPG1的衣殼蛋白Vp1能抑制D、E型沙眼衣原體及臨床株的生長(zhǎng)，因此，我們推測(cè) Vp1蛋白可能具有

2、潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。本研究旨在進(jìn)一步探討 Vp1蛋白對(duì)鸚鵡熱衣原體標(biāo)準(zhǔn)株豚鼠結(jié)膜炎衣原體（GPIC）、沙眼衣原體標(biāo)準(zhǔn)株D， E，F(xiàn)，G，H，I，K以及L2株的作用。
　　[目的]探討衣原體噬菌體衣殼蛋白 Vp1對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體（GPIC）及D, E, F, G, H, I, K及L2這8型沙眼衣原體的作用，觀察其對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體及不同型沙眼衣原體的生長(zhǎng)抑制情況。為臨床上解決沙眼衣原體的感染提供新的治療方向。
　　[方法]

3、用不斷優(yōu)化的重組質(zhì)粒在大腸埃希菌內(nèi)大量表達(dá)衣原體噬菌體 Vp1蛋白，收集、鑒定及純化。將純化后的 Vp1蛋白與豚鼠結(jié)膜炎衣原體及不同型的沙眼衣原體室溫孵育3小時(shí)，接種至單層致密Hela細(xì)胞(或McCoy細(xì)胞)中，在衣原體的培養(yǎng)過(guò)程中加入不同濃度的 Vp1蛋白，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線變化確定Vp1蛋白的最佳作用濃度，在衣原體的換液、離心、孵育過(guò)程中加入最佳作用濃度的 Vp1蛋白，免疫熒光或碘染色計(jì)數(shù)包涵體。同時(shí)采用液體培養(yǎng)基稀釋法檢測(cè) Vp1蛋

4、白對(duì)其它病原體如金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎克雷伯桿菌、白色念珠菌生長(zhǎng)的影響。
　　[結(jié)果]經(jīng)體外重組表達(dá)的衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體及沙眼衣原體均有明顯的抑制作用，作用濃度為51.2ug/ml，其對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體的抑制率約為80.2％，沙眼衣原體標(biāo)準(zhǔn)株D,E,F,G,H,I,K及L2生長(zhǎng)的抑制率分別約為82.7%，78.0%，83.6%，76.9%，69.8%，75.7%，79.2%，86.7%，這一結(jié)果暗示

5、 Vp1蛋白對(duì)沙眼衣原體各株具有普遍的抑制作用。Vp1蛋白對(duì)生殖道其它常見(jiàn)病原體如對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌、鏈球菌及白色念珠菌的生長(zhǎng)抑制作用不明顯。
　　[結(jié)論]本實(shí)驗(yàn)室體外重組表達(dá)的衣原體噬菌體衣殼蛋白Vp1對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體及不同型的沙眼衣原體的生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，而對(duì)其它病原體作用不明顯。
　　本實(shí)驗(yàn)首次探索了衣原體噬菌體衣殼蛋白 Vp1對(duì)豚鼠結(jié)膜炎衣原體及不同型沙眼衣原體的作用。為臨床上沙眼衣原體感染的治