苦參堿下調(diào)模型鼠肺組織MMP-2、MMP-9的表達抗肺纖維化.pdf

1、目的：觀察苦參堿對肺纖維化大鼠肺組織中MMP-2、MMP-9的表達，探討苦參堿抗肺纖維化的可能作用機制。
　　方法：健康雄性SD大鼠60只，隨機分為4組，每組15只。分別為生理鹽水對照組(A組)、博來霉素組（B組）、博來霉素+苦參堿50mg處理組(C組)、博來霉素+苦參堿100mg處理組(D組)。B組、C組、D組均一次性氣管內(nèi)給博來霉素5mg/kg建肺纖維的動物模型；A組以同樣的方法一次性氣管內(nèi)注入等體積的生理鹽水；C組、D組分別

2、在博來霉素給藥后第一天開始以50mg/kg、100mg/kg苦參堿每日灌胃，而A組、B組每日以等體積的生理鹽水灌胃。各組大鼠在造模7d、14d、28d隨機處死5只取材，每次共20只。肺組織HE染色和Masson染色電鏡觀察肺組織切片的肺泡炎和肺纖維化改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)（PV法）和 RT-PCR法分別檢測各組大鼠肺組織中MMP-2及MMP-9蛋白及mRNA的表達。
　　結(jié)果：①肺組織HE染色及Masson染色可見A組大鼠肺組

3、織肺泡結(jié)構(gòu)完整，肺泡間隔無增寬，無間質(zhì)炎癥及纖維化改變。B組在第7天可見肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺泡壁不同程度增厚，肺泡腔內(nèi)大量炎性細胞浸潤，并可見少數(shù)區(qū)域出現(xiàn)膠原沉積及纖維化形成；第14天正常的肺泡結(jié)構(gòu)大量被破壞，肺泡腔內(nèi)仍可見炎性細胞浸潤，肺泡壁普遍增厚，膠原沉積及纖維化程度進一步加重；第28天肺泡炎癥減輕，大量膠原沉積及纖維化形成，幾乎無完整肺泡結(jié)構(gòu)；C、D組肺泡炎和纖維化程度較B組各對應(yīng)時間點均有不同程度的減輕，但仍較A組高。②免疫組化（

4、PV法）和RT-PCR結(jié)果：A組MMP-2和MMP-9表達均較弱，MMP-2： B組各時間段MMP-2表達較A組均顯著增加（P<0.05），表達在第14天達高峰，C、D組兩者的表達在各時間段均較模型組有不同程度減低（P<0.05），且D組比C組降低更明顯，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 MMP-9：B組7天、14天MMP-9表達較A組顯著增加（P<0.05），表達高峰在第7天，C、D組兩者的表達在7天、14天均較模型組有不同