UVRAG和Rubicon在饑餓誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性中的作用.pdf

1、UVRAG是一個(gè)自噬相關(guān)基因，其編碼蛋白通過(guò)與Beclin1結(jié)合增強(qiáng)Vps34/PI3KC3的活性，在促進(jìn)自噬小體成熟中發(fā)揮重要作用。Rubicon與UVRAG相互作用，導(dǎo)致Vps34/PI3KC3的活性下調(diào)，抑制自噬小體成熟。我們的前期工作已證實(shí)，UVRAG基因缺失導(dǎo)致自噬小體與溶酶體融合受阻伴隨自噬小體增多；Rubicon基因缺失促進(jìn)自噬。鑒于自噬能夠調(diào)控脂代謝，本文擬研究UVRAG和Rubicon在饑餓誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性中的作用。

2、
　　為了研究UVRAG在饑餓誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性中的作用，我們給予野生型小鼠和UVRAG基因缺失小鼠正常飲食或24小時(shí)饑餓處理。油紅染色顯示，在正常生理?xiàng)l件下小鼠肝臟無(wú)明顯脂質(zhì)積聚，但是在饑餓條件下，野生型小鼠肝臟中脂質(zhì)積聚明顯增多，UVRAG基因缺失導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)積聚比野生型小鼠進(jìn)一步增多。肝臟脂質(zhì)含量檢測(cè)結(jié)果顯示，饑餓處理的UVRAG基因缺失小鼠肝臟甘油三酯、游離脂肪酸和總膽固醇含量較野生型小鼠顯著升高，與油紅染色結(jié)果一致。實(shí)時(shí)

3、熒光定量RT-PCR顯示在正常生理及饑餓條件下，UVRAG基因缺失小鼠和相應(yīng)的野生型小鼠肝臟脂代謝相關(guān)基因CD36、FAS、CPT-1、PPARα及FGF21表達(dá)無(wú)顯著差異。在正常生理?xiàng)l件下，SREBP1基因在UVRAG基因缺失小鼠肝臟表達(dá)顯著下調(diào)，但在饑餓條件下無(wú)顯著差異。此外，UVARG基因缺失對(duì)脂代謝調(diào)控分子AMPK活性無(wú)顯著影響。在饑餓條件下，UVRAG基因缺失導(dǎo)致血漿甘油三酯和游離脂肪酸濃度上升，而血糖濃度下降。
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4、ubicon基因缺失促進(jìn)自噬，因此我們推測(cè)Rubicon基因缺失可以緩解饑餓誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性。為了證實(shí)這一假說(shuō)，我們給予野生型小鼠和Rubicon基因缺失小鼠正常飲食或24小時(shí)饑餓處理。意想不到的是，Rubicon基因缺失導(dǎo)致饑餓條件下肝臟脂質(zhì)積聚較野生型小鼠進(jìn)一步增多，并且肝臟甘油三酯、游離脂肪酸和總膽固醇含量顯著上調(diào)。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR顯示，Rubicon基因缺失對(duì)正常生理及饑餓條件下肝臟脂代謝相關(guān)基因CD36、CPT-1、

5、PPARα、FGF21表達(dá)無(wú)影響。在饑餓條件下，Rubicon基因缺失小鼠肝臟SREBP1表達(dá)量在較野生型小鼠顯著上調(diào)，但在正常生理?xiàng)l件下無(wú)顯著差異。在正常生理?xiàng)l件下，F(xiàn)AS基因在Rubicon基因缺失小鼠肝臟表達(dá)量較野生型小鼠顯著上調(diào)，但在饑餓條件下無(wú)顯著差異。此外，在饑餓條件下，Rubicon基因缺失小鼠和野生型小鼠肝臟中AMPK活性無(wú)顯著差異。全身Rubicon基因缺失導(dǎo)致饑餓條件下血漿甘油三酯和游離脂肪酸濃度顯著升高。在正常生理