細(xì)胞生物學(xué)研究中的激活劑和抑制劑

1、細(xì)胞生物學(xué)研究中的激活劑和抑制劑 細(xì)胞生物學(xué)研究中的激活劑和抑制劑Anandika Dhaliwal Ph.D.anandika dot dhaliwal at gmail dot comRutgers University, New Jersey, United States譯者 譯者王秀英博士 王秀英博士mary at labome dot com美國新澤西州普林斯頓合原研究有限責(zé)任公司 (Synatom Research)DOIh

2、ttp://dx.doi.org/10.13070/mm.cn.3.185日期 日期更新 : 2013-10-19; 原始版 : 2013-04-27引用 引用實(shí)驗(yàn)材料和方法 2013;3:185介紹 介紹細(xì)胞生物學(xué)研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生理特性及細(xì)胞功能。它涉及到對(duì)細(xì)胞器、細(xì)胞與周圍環(huán)境間相互作用、生命周期、分化及死亡的研究。細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和生物化學(xué)等其它生物學(xué)領(lǐng)域是密切相關(guān)的。圖 1.真核細(xì)胞骨架。肌動(dòng)蛋白纖維顯

3、示為紅色，微管為綠色，核為藍(lán)色。肌動(dòng)蛋白染色使用的是羅丹明-鬼筆環(huán)肽，微管使用的是連接有Alexa488的抗 α 微管蛋白著色劑，DNA 則使用的是 Hoechst 染料。對(duì)于細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的研究者而言，為了更加全面地理解細(xì)胞的功能、細(xì)胞的信號(hào)傳遞以及控制細(xì)胞命運(yùn)、功能及表型的胞內(nèi)機(jī)制，抑制劑與激活劑是至關(guān)重要的研究工具。許多抑制劑和激活劑都被廣泛用于研究細(xì)胞動(dòng)力學(xué)及功能。這里我們對(duì)真核細(xì)胞中各種細(xì)胞生物學(xué)研究如細(xì)胞內(nèi)吞、分泌、粘附、細(xì)

4、胞骨架動(dòng)力學(xué)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體研究中常用的抑蛋白Aldrich 綜合癥蛋白（WASp）家族成員）并抑制 Arp2/3復(fù)合物的活化。該分子阻斷肌動(dòng)蛋白絲的組裝。同樣抑制 PIP2誘導(dǎo)的肌動(dòng)蛋白聚合反應(yīng)(EC50 ~ 4μM)。抑制依賴于肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞功能（遷移、運(yùn)輸、吞噬、內(nèi)褶） 。Aldrich, Tocris BioscienceMycalolide B（C52H74N4O17）肌動(dòng)蛋白它選擇性地將 F-肌動(dòng)蛋白徹底解聚成 G-肌動(dòng)

5、蛋白。 與肌動(dòng)蛋白以1:1的摩爾比進(jìn)行結(jié)合（Kd=13-20 nM） 。溶于 DMSO、甲醇或異丙醇。抑制肌動(dòng)球蛋白 ATP酶。[11][12][13], Santa Cruz Biotechnology, Enzo Life ScienceNocodazole（C14H11N3O3S）微管抑制微管的動(dòng)態(tài)變化并促使微管解聚。與 β微管蛋白結(jié)合并阻止兩個(gè)鏈間二硫鍵中任意一個(gè)的形成。在 DMSO 的溶解度達(dá)10 mg/ml。有絲分裂抑

6、制劑。將細(xì)胞周期阻滯在G2/M 期。抑制各種癌癥相關(guān)的激酶，包括 ABL、c-KIT、BRAF、MEK1、MEK2和MET。[14][15][16][17], Sigma-Aldrich, Tocris Bioscience, Cell Signaling Technology, EMD4Biosciences長春堿（C46H58N4O9 · H2SO4）微管解聚微管。與微管蛋白結(jié)合并誘導(dǎo)其自締形成螺旋形聚合體，抑制微管組

7、裝。溶于水和甲醇。通過阻斷有絲分裂紡錘體的形成將細(xì)胞周期阻滯于 G2/M期。在一些腫瘤細(xì)胞系中誘導(dǎo)凋亡。抑制自噬體的成熟。[18][16][19], Sigma-Aldrich, Tocris Bioscience, EMD4Biosciences, Santa Cruz Biotechnology。秋水仙堿（C22H25NO6）微管與微管蛋白結(jié)合并阻止其聚合在乙醇中溶解度達(dá)50 mg/ml，在水中溶解度可達(dá)100 mM，DMSO