中藥復(fù)方左歸丸、右歸丸和濟(jì)生腎氣丸的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究.pdf

1、中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床用藥的主要形式和手段，也是中醫(yī)藥治療體系的精髓，具備了功效的多向性和適應(yīng)的廣泛性。中藥復(fù)方的準(zhǔn)確鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究是中醫(yī)藥現(xiàn)代研究的核心課題之一。中藥復(fù)方由數(shù)種到數(shù)十種藥材組成，含有幾十至成百上千種化學(xué)成分，是非常復(fù)雜的生物體系。同劑型的中藥復(fù)方產(chǎn)品外觀幾乎無差異，無法通過外觀判斷其品種及質(zhì)量差異，相當(dāng)于一個(gè)黑色體系，對(duì)其進(jìn)行鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)具有重要的的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。
　　 目前有多種方法應(yīng)用于中藥復(fù)方的鑒

2、別和質(zhì)量評(píng)價(jià)，主要有直觀比對(duì)法和模式識(shí)別法。模式識(shí)別法是主要的分析方法，可分為有監(jiān)督模式識(shí)別法和無監(jiān)督模式識(shí)別法。有監(jiān)督模式識(shí)別法多適用于分析白色體系和灰色體系。該類方法依賴選擇對(duì)照樣本或標(biāo)準(zhǔn)樣本，或已知樣本的性質(zhì)，根據(jù)先驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)建立鑒別和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，不適合中藥復(fù)方黑色體系的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究；無監(jiān)督模式識(shí)別法雖不需要訓(xùn)練集或經(jīng)驗(yàn)知識(shí)，但它無法同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣本的聚類與分類，不能對(duì)樣品所屬類別做出明確的鑒別。本論文采用的雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法和

3、⊿Sr等級(jí)序列分析法不需要訓(xùn)練集或經(jīng)驗(yàn)知識(shí)，可歸為無監(jiān)督模式識(shí)別法，但它可同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣本的聚類與分類，兼有有監(jiān)督和無監(jiān)督兩種模式識(shí)別法的特點(diǎn)。同時(shí)，⊿Sr等級(jí)序列分析法綜合了樣品成分種類及含量兩個(gè)方面的信息，使分析結(jié)果更全面、客觀，較只考慮指紋峰峰位的雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法具有更強(qiáng)的鑒別能力。更適合中藥HPLC色譜指紋圖譜的研究。
　　 左歸丸、右歸丸和濟(jì)生腎氣丸是三種治療腎虛的著名中藥復(fù)方產(chǎn)品。其中，左歸丸由八味中藥材組方而成

4、，右歸丸和濟(jì)生腎氣丸分別由十味中藥材組方而成。左歸丸和右歸丸組方中含有六味相同的中藥材熟地黃、山藥、枸杞、鹿角膠、菟絲子、山茱萸；右歸丸和濟(jì)生腎氣丸組方中含有五味相同的中藥材熟地黃，山茱萸，山藥，制附子，肉桂。本論文以這三種成分組成非常相近的中藥復(fù)方產(chǎn)品為代表進(jìn)行了研究，對(duì)其進(jìn)行鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)。
　　 本論文采用系統(tǒng)溶劑（依次為氯仿、無水乙醇、水）分別提取左歸丸、右歸丸和濟(jì)生腎氣丸樣品不同極性區(qū)間的成分。測(cè)試三種中藥復(fù)方樣品系統(tǒng)

5、溶劑提取物和原藥粉末的紅外指紋圖譜以及無水乙醇提取物的高效液相色譜指紋圖譜和核磁共振指紋圖譜。在紅外指紋圖譜的分析中，采用雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法分別對(duì)右歸丸和濟(jì)生腎氣丸、左歸丸和右歸丸進(jìn)行了鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究。其中，在右歸丸和濟(jì)生腎氣丸的鑒定中，首次發(fā)展了傳統(tǒng)的直觀比對(duì)法，依據(jù)正態(tài)分布規(guī)律，判別兩種中藥復(fù)方的FITR指紋圖譜中的特征峰組，并確定其對(duì)應(yīng)的化合物類型，結(jié)合原藥粉末的EDS譜中多種元素的種類和含量信息，對(duì)兩種中藥復(fù)方實(shí)現(xiàn)快速

6、準(zhǔn)確鑒別。在HPLC指紋圖譜和核磁共振指紋圖譜的分析中，采用雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法和⊿Sr等級(jí)序列分析法對(duì)這三種中藥進(jìn)行鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究。本論文共分為五章：
　　 第一章：在查閱大量中藥指紋圖譜文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)中藥指紋圖譜的構(gòu)建技術(shù)方法、數(shù)據(jù)解析方法等進(jìn)行了綜述。同時(shí)概述了研究對(duì)象左歸丸、右歸丸和濟(jì)生腎氣丸三種中藥復(fù)方產(chǎn)品的組方及其各單味藥材的主要化學(xué)成分。介紹了本論文所采用的指紋圖譜解析方法及方法上的創(chuàng)新。
　　

7、第二章：應(yīng)用雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法對(duì)右歸丸和濟(jì)生腎氣丸的紅外指紋圖譜進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，該法能夠準(zhǔn)確區(qū)分這兩種中藥復(fù)方產(chǎn)品，三種系統(tǒng)溶劑提取物（氯仿、乙醇、水）和原藥粉末的紅外指紋圖譜總體上均能實(shí)現(xiàn)兩種中藥的準(zhǔn)確鑒別。首次發(fā)展了傳統(tǒng)的直觀比對(duì)法，根據(jù)兩種中藥復(fù)方的FITR指紋圖譜中的特征峰組及其對(duì)應(yīng)的化合物類型和原藥粉末的EDS譜中多種元素的種類和含量信息，對(duì)兩種中藥復(fù)方實(shí)現(xiàn)快速準(zhǔn)確鑒別。
　　 第三章：應(yīng)用雙指標(biāo)等級(jí)序列聚

8、類分析法對(duì)左歸丸和右歸丸的紅外指紋圖譜進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，該法能夠較準(zhǔn)確地區(qū)分這兩種中藥復(fù)方產(chǎn)品。氯仿提取物、乙醇提取物和原藥粉末聚類結(jié)果合理可靠，原藥粉末聚類結(jié)果最優(yōu)，水提取物聚類結(jié)果相對(duì)較差。
　　 第四章：應(yīng)用雙指標(biāo)等級(jí)序列聚類分析法、⊿Sr等級(jí)序列分析法對(duì)左歸丸、右歸丸和濟(jì)生腎氣丸這三種中藥復(fù)方產(chǎn)品HPLC指紋圖譜進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，⊿Sr等級(jí)序列分析法可較準(zhǔn)確地區(qū)分三種組成相似的中藥復(fù)方產(chǎn)品，其鑒別準(zhǔn)確性明顯地高于