醫(yī)源性膽管狹窄與肌成纖維細(xì)胞的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的:
　　 醫(yī)源性膽管損傷的遠(yuǎn)期并發(fā)癥的常見原因是醫(yī)源性膽管狹窄，如果處理不當(dāng)，不及時(shí)，造成反復(fù)發(fā)作性膽管炎，最終形成膽汁性肝硬變，門靜脈高壓癥，有較高的死亡率和病死率，預(yù)后差。醫(yī)源性膽管狹窄的處理是目前膽道外科的一大難題，術(shù)后突出表現(xiàn)為膽道瘢痕性攣縮和管腔狹窄，尤以肝門部或肝門部以上膽管狹窄最為常見。因此，為了闡明醫(yī)源性膽管狹窄的形成機(jī)制，探討肌成纖維細(xì)胞(myofibroblast,MFB)在醫(yī)源性膽管狹窄形成過程中

2、的作用，我們通過建立家兔肝外膽管損傷修復(fù)模型，術(shù)后動(dòng)態(tài)觀察肌成纖維細(xì)胞在膽道愈合過程中的表達(dá)。
　　 材料與方法：
　　 選取健康家兔24只，雌雄不限，平均體重2.0～2.5kg。通過建立家兔肝外膽管損傷修復(fù)模型，分別于術(shù)后1周、3周、3個(gè)月、6個(gè)月取材行顯微鏡觀察、電鏡觀察和a–平滑肌肌動(dòng)蛋白(a–SMA)免疫組織化學(xué)染色觀察。
　　 結(jié)果:
　　 1.一期術(shù)后10天1只家兔死于膽瘺，2只家兔于術(shù)后1～

3、2月死于梗阻性黃疸，共存活24只；術(shù)后早期食欲、活動(dòng)、反應(yīng)尚正常，遠(yuǎn)期觀察6只家兔3月以上時(shí)出現(xiàn)食欲下降、體重減輕、小便色深及陶土便等梗阻性黃疸表現(xiàn)；術(shù)后腹腔引流管平均引流5～10ml淡血性液體，混有少量膽汁。
　　 2．顯微鏡觀察：術(shù)后1周時(shí)，Masson染色及Verhoeff染色見新生的膠原纖維排列紊亂；術(shù)后3周時(shí)，Masson染色及Verhoeff染色見粘膜下大量膠原纖維增生；3月及6月時(shí)，Masson染色及Verhoef

4、f染色見膠原纖維排列較前整齊，但仍雜亂無序、致密。
　　 3.透射電鏡觀察：MFB功能活躍，持續(xù)存在于整個(gè)膽道愈合過程；其中3月時(shí)瘢痕組織細(xì)胞功能仍較活躍，MFB數(shù)量達(dá)到最多。
　　 4.免疫組織化學(xué)染色觀察：a-SMA表達(dá)于肌成纖維細(xì)胞胞漿，術(shù)后1周至6個(gè)月表達(dá)均較強(qiáng)，與正常對(duì)照比較差異有顯著性(p<0.01),術(shù)后各期表達(dá)差異無顯著性(p>0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.免疫組織化學(xué)結(jié)果證實(shí)了a