經(jīng)皮椎體成形術(shù)注射骨水泥對(duì)椎體腫瘤細(xì)胞毒作用的臨床和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究分三部分，第一部分、經(jīng)皮骨成形術(shù)治療疼痛性成骨性骨轉(zhuǎn)移癌
　　 目的：研究經(jīng)皮骨成形術(shù)治療疼痛性成骨性骨轉(zhuǎn)移癌的有效性和安全性。
　　 方法：6名成骨性骨轉(zhuǎn)移癌患者在X線透視或CT引導(dǎo)下接受經(jīng)皮骨成形術(shù)。記錄患者術(shù)前及術(shù)后的VAS疼痛得分，記錄穿刺所用透視時(shí)間及骨水泥用量情況。
　　 結(jié)果：6名患者接受經(jīng)皮骨成形術(shù)后疼痛得到立即緩解，術(shù)中未發(fā)生有嚴(yán)重臨床癥狀的并發(fā)癥。4名脊柱病變患者的穿刺平均透視時(shí)間為10

2、.3±1.1分鐘，骨水泥的平均用量為3.8±1.4ml，骨水泥最少用量為2.2ml。
　　 結(jié)論：經(jīng)皮骨成形術(shù)治療疼痛性成骨性轉(zhuǎn)移癌，止痛效果滿意，操作安全。
　　 第二部分、CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺接種VX2瘤塊制作兔椎體腫瘤模型
　　 目的：探討CT導(dǎo)引下經(jīng)皮穿刺建立兔VX2椎體腫瘤模型的可行性，研究兔后肢癱瘓的發(fā)病時(shí)間、影像學(xué)表現(xiàn)及病理表現(xiàn)。
　　 材料與方法：CT導(dǎo)引下經(jīng)皮穿刺將VX2瘤塊接種入32只新

3、西蘭大白兔的L4或L5椎體內(nèi)，接種術(shù)后每天兩次評(píng)估兔后肢運(yùn)動(dòng)功能，記錄兔出現(xiàn)后肢癱瘓的時(shí)間。于接種后14天、21天、28天和兔出現(xiàn)后肢癱瘓時(shí)行兔腰椎MRI、CT檢查。接種術(shù)后21天和28天，各分別隨機(jī)選擇2只影像學(xué)檢查已提示腫瘤生長(zhǎng)但無癱瘓癥狀實(shí)驗(yàn)兔。其中1只行PET-CT檢查后，對(duì)其行椎體成形術(shù)后處死，另一只直接處死后取出腰椎進(jìn)行病理學(xué)檢查。余實(shí)驗(yàn)兔則于出現(xiàn)后肢癱瘓時(shí)處死行病理學(xué)檢查。接種后三月將仍無后肢癱瘓癥狀實(shí)驗(yàn)兔處死，取出原腫瘤

4、接種部位腰椎行病理學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)共有29只兔椎體腫瘤種植成功，成功率90.6％(29/32)。另有3例建模失敗，其中1例腫瘤椎旁生長(zhǎng)，2例腫瘤種植失敗。接種術(shù)后14天，MRI檢查顯示1只無臨床癱瘓癥狀實(shí)驗(yàn)兔椎體內(nèi)已有腫瘤生長(zhǎng)；接種術(shù)后21天，21只實(shí)驗(yàn)兔MRI及CT檢查顯示椎體腫瘤生長(zhǎng)，其中19只實(shí)驗(yàn)兔無后肢癱瘓癥狀；接種術(shù)后28天，又有7只實(shí)驗(yàn)兔MRI及CT檢查顯示椎體腫瘤生長(zhǎng)，其中6只實(shí)驗(yàn)兔無后肢癱瘓癥狀。實(shí)驗(yàn)

5、兔后肢癱瘓癥狀出現(xiàn)前，共26只實(shí)驗(yàn)兔影像學(xué)檢查顯示腫瘤生長(zhǎng)。除于術(shù)后21天、28天各隨機(jī)處死的2只經(jīng)影像學(xué)證實(shí)的成瘤兔外，余25只實(shí)驗(yàn)兔在后肢癱瘓癥狀出現(xiàn)時(shí)，影像學(xué)檢查皆顯示有腫瘤生長(zhǎng)。兔出現(xiàn)后肢癱瘓癥狀的時(shí)間最早為19天，最晚36天，平均26.4±4.2天。腰椎MRI檢查顯示L4或L5椎體內(nèi)異常信號(hào)，局部脊髓受壓，伴椎體周圍軟組織腫塊。CT掃描表現(xiàn)為不規(guī)則溶骨性骨質(zhì)破壞，伴瘤骨形成，椎體周圍可見軟組織腫塊生長(zhǎng)。術(shù)后21天、28天各隨機(jī)

6、選取的一只行PET-CT檢查的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，PET-CT結(jié)果顯示腫瘤椎體核素濃聚，PET-CT后皆順利接受PVP治療，骨水泥于椎體內(nèi)沉積良好。所有成瘤模型均經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)椎體內(nèi)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。
　　 結(jié)論：CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺種植兔VX2瘤塊法制作椎體腫瘤模型可行性好，操作簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成瘤率高。接種術(shù)后21天行MRI及CT掃描能較早確定腫瘤模型制作成功。
　　 第三部分、經(jīng)皮椎體成形術(shù)中注射骨水泥對(duì)兔椎體腫瘤的細(xì)胞毒作用

7、r>　　 目的：評(píng)估PVP術(shù)中注射骨水泥對(duì)活體椎體腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。
　　 方法：選取30只成功建立椎體腫瘤模型的實(shí)驗(yàn)兔，對(duì)腫瘤模型椎體行PVP治療。按PVP術(shù)中注射材料不同，將模型動(dòng)物隨機(jī)分成3組，每組10只。A組：注射0.3mlPMMA骨水泥組；B組：注射0.3ml CPC骨水泥組；C組：注射0.3ml生理鹽水的對(duì)照組。所有模型動(dòng)物接受PVP治療前行PET-CT檢查，測(cè)定椎體腫瘤的SUV最大值(SUVmax)及SUV平

8、均值(SUVmean)，然后模型動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)分組于CT引導(dǎo)下接受PVP治療。PVP治療后，各實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后第1天、第4天各選取5只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，按術(shù)前檢查方法再次接受PET-CT檢查，測(cè)定腫瘤椎體與自身正常L1椎體的SUVmax、SUVmean值。然后處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取腫瘤椎體標(biāo)本行HE染色、TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)、Bcl-2及Bax免疫組化染色。光鏡下觀察椎體腫瘤內(nèi)注射骨水泥后，在骨水泥周邊以及遠(yuǎn)離骨水泥處的腫瘤細(xì)胞壞死情況。檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的凋亡

9、指數(shù)、Bcl-2及Bax陽性染色細(xì)胞染色率，并測(cè)定TUNEL檢測(cè)，Bcl-2及Bax染色的吸光度。采用可重復(fù)檢驗(yàn)的方差分析比較治療前后腫瘤椎體及自身正常L1椎體的SUVmax、SUVmean值有無差異。采用析因分析，比較治療后各組的腫瘤椎體及自身正常L1椎體，在不同時(shí)間點(diǎn)間的SUVmax、SUVmean值有無差異。采用析因分析比較治療后不同實(shí)驗(yàn)組間、不同時(shí)間點(diǎn)間、骨水泥周邊及遠(yuǎn)離骨水泥處的腫瘤細(xì)胞的凋亡指數(shù)、Bcl-2及Bax陽性染色細(xì)

10、胞率，以及相應(yīng)的染色吸光度有無差異。
　　 結(jié)果：PET-CT檢測(cè)結(jié)果顯示PMMA組腫瘤椎體SUV值治療前與治療后各時(shí)間點(diǎn)間皆存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，治療后SUV值明顯降低，以治療后第1天降低最明顯，余兩組則無明顯變化；治療后各時(shí)間點(diǎn)腫瘤椎體SUV值PMMA組與CPC組及生理鹽水組之間皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，但CPC與生理鹽水組之間無差異。HE染色結(jié)果顯示治療后第1天PMMA組骨水泥周邊區(qū)域腫瘤細(xì)胞明顯壞死，在壞

11、死的腫瘤細(xì)胞中可見少許殘存的腫瘤細(xì)胞，尤以遠(yuǎn)離骨水泥的腫瘤區(qū)域內(nèi)較多見，治療后第4天骨水泥周邊殘存腫瘤細(xì)胞較第1天有明顯增多，遠(yuǎn)離骨水泥處腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)活躍。余兩組各時(shí)間點(diǎn)腫瘤細(xì)胞壞死不明顯。TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示：凋亡指數(shù)在不同材料組間、不同部位間以及不同時(shí)問點(diǎn)間比較都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。PMMA組、CPC組、對(duì)照組的凋亡腫瘤細(xì)胞依次減少。治療后各時(shí)間點(diǎn)PMMA組骨水泥周邊腫瘤細(xì)胞凋亡明顯，遠(yuǎn)離骨水泥的腫瘤細(xì)胞亦可見

12、部分調(diào)亡，治療后第1天腫瘤細(xì)胞凋亡較為明顯，治療后第4天腫瘤細(xì)胞凋亡減少。術(shù)后第1天CPC組骨水泥周邊可見部分凋亡腫瘤細(xì)胞，遠(yuǎn)離骨水泥處腫瘤細(xì)胞凋亡較少，術(shù)后第4天腫瘤細(xì)胞凋亡不明顯。對(duì)照組僅術(shù)后第1天腫瘤內(nèi)見少量調(diào)亡腫瘤細(xì)胞。吸光度結(jié)果與凋亡指數(shù)結(jié)果類似。BAX染色與凋亡檢測(cè)一致，而Bcl-2與之相反。
　　 結(jié)論：PMMA骨水泥對(duì)活體椎體腫瘤細(xì)胞有明顯的細(xì)胞毒作用，并能顯著誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，且其對(duì)鄰近腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，強(qiáng)