歸脾丸(濃縮丸)多指標(biāo)質(zhì)控方法研究.pdf

1、目的：歸脾丸(濃縮丸)由(黨參、炒白術(shù)、炙黃芪、炙甘草、茯苓、制遠(yuǎn)志、木香、當(dāng)歸、龍眼肉等)11味藥材組成，原標(biāo)準(zhǔn)(YBZ11062009)收載了4味藥材的薄層鑒別與甘草酸的定量測定(HPLC)。但薄層鑒別需4種供試品溶液，4塊薄層板，經(jīng)4次薄層展開，而且供試品前處理繁瑣、費(fèi)時，需花費(fèi)8小時，660ml有機(jī)試劑，污染環(huán)境，危害健康。甘草酸的定量測定在專屬性上存在著問題，即供試品溶液在與甘草酸對照品相同的保留時間，其波峰的光譜掃描圖與甘草

2、酸的不一致，不是同一化合物或包覆著雜質(zhì)峰，無法準(zhǔn)確定量測定。且流動相還是緩沖鹽體系，易損壞色譜柱。響應(yīng)國家減排、降耗、提效的號召，在不降低檢測指標(biāo)的情況下，為制定簡便、快捷、準(zhǔn)確的歸脾丸質(zhì)量控制方法，對原方法進(jìn)行了簡化與提高研究，獲得了理想的研究結(jié)果。
　　方法：采用同一甲醇超聲的供試品溶液和甲醇超聲的對照藥材上清液，分別以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(8:2:0.2)，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨(12:1:3:0.5)，環(huán)己烷-乙

3、酸乙酯-甲酸(19:0.5:0.1)，氯仿-甲醇-水(7:3:1)為展開劑，采用紫外光燈下直接檢視或噴以10％硫酸乙醇溶液、或2％磷鉬酸無水乙醇溶液，加熱顯色后日光下檢視斑點(diǎn)的檢視技術(shù)，在4塊薄層板上，完成了當(dāng)歸、木香、白術(shù)、甘草、龍眼肉、黨參和遠(yuǎn)志的薄層鑒別。采用HPLC法，以非緩沖鹽體系乙腈-甲醇-0.1％磷酸(37:18:45)，取代原緩沖鹽體系甲醇-0.2％的乙酸銨-冰醋酸(55:45：0.5)作為流動相，以甘草酸銨、藁本內(nèi)酯為

4、測定指標(biāo)，重新對供試品進(jìn)行了提取溶劑(70％甲醇)、超聲時間(15、20、30分鐘)、檢測波長(250nm)、色譜柱耐用性(3種不同廠家、不同型號色譜柱)、線性范圍、精密度(5次連續(xù)進(jìn)樣)、穩(wěn)定性(24h)、重復(fù)性(高、中、低劑量，9次測定平均值)，回收率(高、中、低劑量，9次測定平均值)等一系列方法學(xué)探討研究，建立了簡便、快捷、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、精密度高的歸脾丸質(zhì)量控制新方法。
　　結(jié)果：突破了目前一個樣品溶液，一塊薄層板，一種顯

5、色劑，鑒別一味藥材，繁瑣、費(fèi)時的傳統(tǒng)鑒別方式，創(chuàng)建了同一種供試品溶液，在4塊薄層板上，同時鑒別7味藥材的快速鑒別新方法。該方法鑒別7味藥材，只需供試品前處理溶劑(甲醇)20ml，展開劑30ml，時間4小時。與原標(biāo)準(zhǔn)比較，在增加3項(xiàng)薄層鑒別和藁本內(nèi)酯定量測定的情況下，完成一批供試品還比原標(biāo)準(zhǔn)節(jié)約有機(jī)試劑640ml、時間4小時。通過多種流動相的重組與配比，以非緩沖鹽取代了緩沖鹽作為流動相，使供試品中的甘草酸與干擾成分得到有效分離，有效提高了

6、定量測定的專屬性。通過方法學(xué)考察，甘草酸進(jìn)樣量在0.0695～1.3900μg，與峰面積呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=795463X-583，r=0.99999，最低檢出限0.02μg，最低定量限0.06μg；藁本內(nèi)酯進(jìn)樣量在0.1665～1.3320μg，與峰面積呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=556046X+611，r=0.99999，最低檢出限0.03μg，最低定量限0.12μg；重復(fù)性實(shí)驗(yàn)表明：高、中、低劑量，9次測定的結(jié)果

7、，甘草酸平均含量為1.46mg/g，RSD為0.64％，藁本內(nèi)酯平均含量為1.02mg/g，RSD為1.21％；采用加樣回收實(shí)驗(yàn)，高、中、低三劑量，9次測定的甘草酸和藁本內(nèi)酯平均回收率分別為98.9％和99.0％，RSD為0.68％和0.75％(n=9)；精密度、穩(wěn)定性、專屬性、色譜柱耐用性實(shí)驗(yàn)均符合方法學(xué)要求。
　　結(jié)論：簡化和提高后的歸脾丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，適用于生產(chǎn)中簡便、快捷、準(zhǔn)確、低成本，高效率地控制歸脾丸質(zhì)量。本方法的研究成功

8、，不但解決了目前薄層鑒別繁瑣、費(fèi)時，有機(jī)溶劑消耗量大，易造成環(huán)境污染、危害操作人員健康的落后局面，而且體現(xiàn)了科技創(chuàng)新為社會帶來的提高工作效率、節(jié)約檢測成本、減少環(huán)境污染的顯著經(jīng)濟(jì)效益與社會效益。提高效率，節(jié)約資源，降低成本，減少污染，則是從另一個角度發(fā)揮同樣作用的硬指標(biāo)。目前的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不論鑒別還是含量測定，都存在著前處理提純繁瑣、毒害試劑用量大，費(fèi)時長、成本高等弊端。如若本研究在同行中，能起到拋磚引玉的示范作用，其對社會的貢獻(xiàn)將是不